文档介绍：还原糖和总糖的含量测定—— 3,5- 二硝基水杨酸比色法一、目的掌握还原糖和总糖测定的基本原理, 学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用。仪器规格(mL) 数量刻度试管 25 11 烧杯 100/250 6/1 锥形瓶 100 1 容量瓶 100\250 4\1 量筒 502 棕色瓶 1 水浴锅 1 离心机天平分光光度计 1 试剂规格葡萄糖标准液 1mg/mL 3, 5- 二硝基水杨酸( DNS ) 碘- 碘化钾溶液酚酞指示剂 HCI 6M NAOH 6M 材料: 小麦面粉;精密 pH 试纸四、操作步骤 1. 制作葡萄糖标准曲线取7支 20mL 具塞刻度试管编号,按表 1 分别加入浓度为 1mg/mL 的葡萄糖标准液、蒸馏水和 3,5- 二硝基水杨酸( DNS ) 试剂,配成不同葡萄糖含量的反应液。表1葡萄糖标准曲线制作 2. 样品中还原糖和总糖的测定(1 )还原糖的提取准确称取食用面粉,放入 100mL 烧杯中,先用少量蒸馏水调成糊状, 然后加入 50mL 蒸馏水, 搅匀, 置于 50℃恒温水浴中保温 20min , 使还原糖浸出。将浸出液( 含沉淀) 转移到 50mL 离心管中,于 4000r/min 下离心 5min, 沉淀可用 20mL 蒸馏水洗一次,再离心,将二次离心的上清液收集在 100mL 容量瓶中, 用蒸馏水定容至刻度, 混匀, 作为还原糖待测液。(2 )总糖的水解和提取准确称取食用面粉,放入 100mL 三角瓶中,加 15m L 蒸馏水及 10mL 6M HCl ,置沸水浴中加热水解 30min (水解是否完全可用碘- 碘化钾溶液检查