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文档介绍：研究论文
ALG11-CDG突变蛋白在原核细胞中的稳定表达
王佩， ，王，高晓冬*
(江南大学生物工程学院， 江苏无锡214122)
摘要：甘露糖基转移酶Algll是N糖基化途径中的关键酶，催化第4和第5个甘露糖(Man)残
基以a-1,2连键的形式转移到底物Man3- GlcNAc2-PP-Dol 生成Man5-GlcNAc2-PP-Dol ,人
类ALG11基因致病突变会导致相关的先天性糖基化疾病ALG11-CDG (Congenital Disorders of
Glycosylation)。目前，对ALG11-CDG的研究更侧重于其临床症状，而患者Algll突变蛋白的性
质还有待探索。作者以研究ALG11-CDG突变蛋白的重组表达及活性为目的，首先在人胚胎肾
细胞HEK293 和酿酒酵母中分别表达了 Algll野生型及突变体蛋白，发现其表达量存在显著差
异，突变体蛋白不能稳定表达。最终在大肠杆菌中成功稳定表达了野生型及ALG11-CDG相关
突变蛋白，利用液质联用定量分析了蛋白质的活性，结果显示，突变蛋白的活性存在不同程度的
降低，其降低程度与ALG11-CDG疾病的严重程度存在一定的相关性。上述研究结果证明：
1&ALG11-CDG相关突变蛋白的不稳定有可能是造成疾病的原因之一；2)体外定量测试大肠杆
菌表达的ALG11-CDG相关突变蛋白的活性可以为相应患者的疾病严重程度提供参考。
关键词：N-糖基化；糖基转移酶Alg11；ALG11-CDG；酶活
中图分类号:Q 786 文章编号： 1673-1689( 2021 )02-0065-08 D01:. 1673-
Stable Expression of ALG11-CDG Mutant Proteins in Prokaryotic Cells
WANG Pei, LI Shengtao, WANG Ung, GAO Xiaodong 5
( School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122 , China)
Abstract: As a key enzymein the N-glycosylation pathway, mannosyltransferase Algl 1 catalyzes the
addition of 4th and 5th mannose residues to the substrate Man3-GlcNAc2-PP-Dol with the ! -1,2