文档介绍：关子学搜论文原刨性鞠使嗣授投豹声鞠零A濒娶蹙麴喾键埝文,甍凌尊搏攒蜉下,独立进纷科攀研;徽取褥瓣成莱。辩簌谂文研究辩褥洽警捺譬、帮赣衮散穗黧婺 j黻黝个人绒熊体,均礁文中瞩确说明。零声明的法律赞侄出本、熬燕。本人竞垒了解妇畚裳攮走学崧美傺爨黎傻耀攀嫂论文姻觌主,簿嚣攀蔽绦露褰攘婺求觏国家餐美酃瓣域撬鞠送交论文缓璇器鞠姑子舨,允许论文被蜜蠲稻锵瓣。本人攫粳出裘农炊丈学麓冀将零擎霞谂文戆垒嫠或韶努巍骞壤入露美数攘瘴避纷竣索,霹基采翊影鞠、编印或箕饿复制学段像襻论文裙汇缝本攀健谂交。黎密莞交鑫簿密嚣痰遴毒簸糕定。论文霉毒签懿:麴鬓警搏煞褒:司翁辞山东农妲大学硕士学位论文闻接ELISA梭测新型鸭癜抗体和IFA检测新型鸭瘟病毒的研究攘要“‘本研究对新擞鸭瘟病毒(暂定名)的撼纯方法,检测新型鸭瘟瘸毒抗体的伺接ELISA方法,对病簿抗原进行定位的间接免疫荧光法,不同继代代次豹鹤珏尿囊渡鼹鹃豹致痰力与撬覆捡斑搴豹关系遴孬7磷究,确定了瘸毒抗原的最佳搬纯方法,间接ELISA的最佳反应条件和其敏感性、特异性和熏复性,对瘸毒抗原进彳予了定位,确患了不同代次的病毒对鸭的致病力麓抗原检出率熬关系。绩巢表骥:以50%稳彝疫(N糨)2S04法或10% PEG6000沉淀法糖提,再经Sephadex(}-200层析缝纯,W获褥纯度较麓的瘸獭摅原;间接ELISA方法檎溅新型鸭瘟墩清抗体有很i断韵敏感性,特异性翻鬟复健:阋攘氮痰荧光法涯爽病毒雷赣潋鹦的野、滕最煮,其次为照滚、越、舞整努褥餐;蕤蓑魏鼹浚数壤多,该瘸毒黠鹎瓣致病秀露显减弱, 20代后基本不齄使鸭发耘饿熊强鸭体癍猢瓢增殖i对瘸霉检出率没有影响。 t 本磺究共分瓣部分; i 第·都分=|静}疆鸭瘫瘸獭盼撼纯,. 。。从自然发痕毵霞恩奄熟型黻德瘸捌中分离到一株瘸毒i揍种12日龄簧鹣凝捷找,皎熊寮荤蔓爨毒黪癸l擞繇窭乒獭肄毒炎登糕变魏攀艇嚣囊滚, 分剐馘50%泡黪壤剁嚣《)2零铷i魏,纂嘲籀静度掰暖4薨!S{X法一嚣%PEG。|6000 沉淀法t∞%瓒瀚簸∞。虢撼活糖褥鹦题鬃瓣灌审髓病卷j、爵经Sephadex G-200屡撰,缝傀程摄癣毒捞蕊。势燕麟攀怒流速。络莱漤赡班鳕鳐魄鹈囊CNH也s04法稀]0%PF麟000沉淀法粗髓瘸毒簸栗稿瀵, 。,、拖飓,同样影喻分离效果。第二部分:溺接ELISA稔溪蘩鬟鹩症纛清抗俸; 将纯化病毒作为包被抗原,,包被后3TClh转入4 。C过夜包被效果较好:封闭麟以37℃lh、瓶滴加入后以37℃1h、酶标抗体热入嚣鞋37℃l纛爱痤,效鬃羧理想,酶弦浚霹王终浓波0,25ug/ml。经撞帮福英:间接ELISA检涮新受鹏艇病毒抗体和IFA棱涮蕲型鸭癜璃舞的研究测30份阴性血清,袭明阴、,受梭血清赢于此傻楚秀鞠往:羧测酸毒雉鹎蛊涛摭镶,狳发瘸器l一3天凑惫羧死亡耆隶羧溅抗体外,其余检测绪果均为阳性,捡出率80%;免疫雏鸭可龛部检出阳性。经对不同标准阳性呶清和自制阳性m清的检测,证明新型鸭瘟阳性血清与鸭痘鞭瞧盘涛毒部分糖关性,毒其宅{#摆关投瓣牲盘渣不褰在交叉反戏。对6份血清在不嗣时闽相同条件下检铡3次,判定结果完念相同。以上研究表明该方法具有徽高的敏感性、特异性和重复性。第三部分;闻接受疫荧必法瓣病毒抗原进符定位势剐用NDPV、DPV对lO麓龄稻so弱靛鹤攻毒,入溅复裁病铡,予攻毒精不同时间采集病料,作冰冻切片和组织压印片,IFA法检测瘸鸯抗原。续聚衰明NDPV对雏鸭致瘸凳较强,DPV莠使戚鹦教癍;雏鸭攻凑 NDPV惹爱佳采弹辩润魏袭霉嚣72h;滚毒DPV霜毒缝采榉荧蜜。强瓣举同病料检测,表弱NDPV帮瑚蝴禳零瓣***种二攀溺丑静的麟俸海蹭獾部位基本槌圊,即肝、脾含量最高,其次为斑液,褥者为腋、鼻靛分泌物。备莲器鹣溶冻鬟冀羧懑搴饔显毒予鬟零篾; 第蹰部分:不同代次豹病毒液对鸭的致病力每抗原检出幕驹关系分嚣Ⅱ用第2、5、“1。。、2“。叠$,德鸭魅壤瀵滚攻毒1皤龄绻鲞鸭,,每糕孓爨。缝爨裘甓叠髓罄越健凌鼗攀多,。该寰鼙辫囊鹅酶致瘸力明显减弱。藻2、5、I1锈代瘸毒液蜀媲囊糍冁鸦获瘸嘏薨,幕15j 20代瘸辫液只能使熊穗宥轻徽发瓣寨虢;案25骶瘸毒液攻瓣满雏鸭表现惩常。每维缝鹦都聚壤疯鹳霉IFA羧棱溅瘸毒,稿豢纂遣噻,誉璃钱次黪痰簿都辘谯罐鹇傣内增熊,置溪蘧蒜繇籀润,瘸毒糗蹬攀基本捆两: 美镩词:新型鹎瘟病毒;间接眺:瞬按照痰荧光;检测;定位 2 垂糸表监炎学矮士学毽避文 Studies on theDetetion ofAntibocUes against New