文档介绍：不同激素对甜叶菊生根过程中 POD 和酯酶同工酶表达的影响农学专业学生: 金帮翠指导老师: 张子学摘要: 以甜叶菊组织培养苗为材料,采用聚丙烯酰***凝胶电泳研究激素对甜叶菊生根中 POD 和 EST 同工酶表达的影响。结果表明:不同处理间同工酶活性表达上有明显的不同。 NAA 和 IBA 对调节甜叶菊生根中 POD 、 EST 同工酶活性的表达有明显的影响,而对培养 30 天的不同处理 EST 同工酶的种类的表达也有明显的差异。另外,激素 NAA 和 IBA 对调节甜叶菊生根中 POD 和 EST 同工酶活性方面存在相互作用,并且 IBA 对甜叶菊生根中 POD 和 EST 同工酶表达的影响比 NAA 强。关键词: 甜叶菊;激素; POD ;酯酶;同工酶甜叶菊原产于南美洲,为亚热带多年生宿根系菊科植物[2] 。其叶片中含有甜叶菊糖苷,甜度相当于蔗糖的 300 倍,但所含热量仅为蔗糖的 1/300 左右,是目前已知最甜的天然糖料,以作为天然的甜味添加剂应用于食品工业,如在饮料糖果糕点等生产上的应用,而且其成本比蔗糖低 50% 以上[1][2] 。另外甜叶菊糖苷在人体内不会代谢,也不会残留或产生副作用,对肥胖症、低血糖、糖尿病、小儿龋齿、高血压、心脏病等具有一定的防治效果和辅助疗效[3][4] 。甜叶菊一般以种子育苗法简便宜行,成活率高,但繁殖周期长,繁殖系数小,不能满足生产上对甜叶菊的需求[5] 。同时,目前推广的甜叶菊品种多为杂交种,后代分离范围大产量品质下降。采用组织快繁技术,既可保持优良品种的固有特征,又可加速优良品种的繁殖,适应甜叶菊产业化的需求。同工酶是指能催化同一化学反应,但其酶蛋白本身的分子结构却有所不同的一组酶[6] 。同工酶电泳图谱的多态性变化反映了蛋白质水平的差异,这种差异是由于基因表达的不同引起的, 它是基因表达的产物,在一定程度上能够判断基因的存在及表达规律[7][8][9] 。过氧化物酶(POD )和酯酶(EST )在高等植物体内普遍存在。POD 作为酶防御系统的重要保护酶,能抑制膜脂过氧化作用,延缓细胞衰老;EST 是生物体内催化羧酸酯类化合物水解和合成的一类酶,被认为可能在生理功能上有转酯作用[10]。近年来,国内外科研工作者利用同工酶酶谱的测定,对动植物进行了亲缘关系鉴定、杂种优势测定、植物雄性不育和基因定位等研究工作[11][12] 。但以组织培养获得的甜叶菊为材料,进行同工酶酶谱的分析尚未见报道。本试验研究不同激素对甜叶菊生根中 POD 和EST 同工酶表达的影响,从酶学角度对甜叶菊组培过程中的生长情况的差异加以阐述,揭示组培过程中激素对甜叶菊的调控作用,为基因表达的深层研究打好基础,同时也为建立甜叶菊快速繁殖技术体系提供参考依据。 1. 材料与方法 FA1004N 上海精密科学仪器有限公司无菌接种箱 SW-CJ-2FD 苏净集团苏州安泰空气技术公司电泳槽 DYC rp-28D 北京市六一仪器厂干燥箱 GZX-9076MBE 上海博迅实业有限公司稳压稳流电泳仪 DYY-2 北京市六一仪器厂电热恒温培养箱 上海跃进医疗器械厂海尔冰箱 BC/ 青岛海尔特种电冰柜有限公司光照培养箱 PYX-250G-A 广东医疗器械厂全自动不锈钢双层立式电热蒸汽压力消毒器