文档介绍：山楂叶片中总黄***的提取及检测 1前言山楂系蔷薇科山楂属植物。山楂叶中含有芦丁、金丝桃昔、懈皮素、牡荆素等多种黄***类化合物,药理及临床实验表明:山楂叶黄***类化合物对心血管系统具有降压、降血脂、增加冠脉流量、改善心肌供血供氧等功效,对血压、高血脂冠心病及心绞痛等心血管疾病均具有良好疗效。此外,山楂叶黄***类化合物有较高的抗氧化、抗自基活性,是生产天然保健食品较为理想的添加剂。我国各地均有山楂栽培,山楂叶资源丰富但尚未得到开发利用, 故价格低廉。山楂叶中黄***类化合物含量高达 2%, 为果实含量的 20-120 倍。因此,从山楂叶中提取黄***类化合物既可以充分发挥我国的资源优势,又可以提高山楂树的经济价值,并可进一步研制开发出多种保健食品,山楂叶有着广阔的发展前景。本文对山楂叶中黄***类化合物的提取及测定方法进行了探索及研究,旨在为山楂叶的综合利用和开发提供参考。 2实验原理大多数黄***类化合物分子中存在肉桂酰基和苯甲酰基组成的交叉共轭体系,其MeOH 在200nm -400nm 的区域内存在两个主要的紫外吸收带, 紫外分光光度法依据黄***自身结构的特点,不使用显色剂,直接在其特征吸收峰处对试样进行测定。提取黄***类物质的方法主要有水提法,有机溶剂的提取法,相对于有机溶剂的提取,水提法的黄***提取率较低, 而有文献[1] 可知***的提取效果比乙醇、甲醇好,以70% ***提取最好。但是由于***价格较贵且含有毒成分,生产上一般不用。乙醇的提取体积分数低于 60% 时过滤出现困难, 而且为了后续的过滤、回收溶剂、干燥等操作也比较容易,所以本实验以 70% 乙醇溶剂进行提取。 3仪器与试剂材料:山楂叶( 65℃时烘干,粉碎,过 60目筛) 仪器:紫外可见分光光度计( UV2550 型紫外可见分光光度计) ;分析天平(万分之一天平);索氏提取装置一套;减压蒸馏装置一套 100ml 容量瓶 2个; 25ml 容量瓶 10个;吸量管( 1ml 、2ml 、5ml ) 试剂:芦丁(生化试剂) ;无水乙醇( AR ,天津化学试剂批发公司) ;正丁醇( AR); 去离子水 4实验内容 标准溶液的配制和标准系列的优化条件选择: 标准曲线的配制: 将芦丁标准品于 120 ℃下干燥至恒重,准确称取芦丁对照品 ,用30% (体积分数)的乙醇溶解定容于 100ml 的容量瓶中,得到浓度为 的标准液。准确吸取芦丁标准液 0ml、 ml、 、 、 、 于25ml 的容量瓶中,并用 30% 的乙醇定容。 标准系列优化条件的选择: 用紫外可见分光光度计对芦丁对照品标准系列溶液在200nm —400nm 的波长范围内进行扫描,观察芦丁对照品的标准系列的吸光度—波长曲线,选择最佳的吸收波长进行测定。选择好吸收波长后对标准系列进行测量,同时绘制吸光度—浓度曲线。 检出限的测定: 用30% 的乙醇溶液进行 12次平行测定,得到其测定的吸光度,由所得的 A计算其标准偏差σ,同时对待测的样品溶液(其质量浓度为 c)进行 6次平行测定,得到吸光度的平均值 A,那么检出限 Dc: Dc= ·3σ 样品的前处理与样品溶液的配制: 样品的处理: 称取山楂叶粉末 装入滤纸桶内