流式细胞的原理及临床应用.ppt

文档介绍：流式的原理及临床应用
技术支持部 胡荣连
1
什么是流式细胞仪？
检测流动中细胞（颗粒）的仪器
目标物可以是细胞、~50um范围内
2
流式细胞仪原理介绍
3
流式细胞仪基本原理示意图
4
流式细胞仪检测什么信号？
细胞
抗原
抗体
荧光
激光束
5
通过流式细胞仪我们可以得到以下信息 - 相对细胞颗粒密度和内部复杂度(SSC)  - 相对细胞大小(FSC)  - 染色过细胞的相对荧光强度
6
流式细胞仪标本准备
染色的一般原则及方法
7
标本来源：
外周血、骨髓、组织块、培养细胞、脱落细胞及其他。
以及血清或各类体液样本。
8
抗体染色一般方法
外周血白细胞分析：100ul全血
血小板分析：1~5ul全血（根据样本血小板数量）
红细胞分析：1ul全血（根据样本中红细胞数稀释后使用）
骨髓：100ul
其他样本，计数后决定使用体积
目标细胞数量及检测终浓度：1×106/ml
9
孵育、溶血、固定
抗体孵育：室温下避光15分钟（某些情况下如：细胞内因子检测需冰育）
溶血：如样本含中有红细胞需溶血
样本溶血后离心上机检测（固定后可放置较长时间）
10