文档介绍：英文缩写表
英文缩写表
肺澳氯磷酸盐
丑脑富含透明质酸结合蛋白
碱基对
牛血清白蛋白
互补脱氧核糖核酸
互补核糖核酸
硫酸软骨素蛋白聚糖
焦碳酸二乙醋
脱氧核糖核酸酶
脱氧核糖核昔三磷酸
脱氧胸昔三磷酸
乙二胺四乙酸
表皮生长因子
糖胺聚糖
糖基磷脂酞肌醉
透明质酸
异丙基硫代一一半乳搪昔
小鼠白血病病毒逆转
录酶
信使核糖核酸
川匕。硝基四氮哇蓝
磷酸缓冲盐液
聚合酶链式反应
聚乙烯毗略烷酮
末端随机扩增
核糖核酸酶
吐幼逆转录
逆转录聚合酶链式反应
十二烷基硫酸钠
标准柠橡酸盐氯化钠液
三轻甲基氨基甲烷
辛基酚聚乙二醇醚
澳一今氯噪一半乳糖普
中文摘要
摘要
胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发性恶性”瘤·赓袭性生长的特“给手
术彻底切除带来困难,是胶质瘤复发率高、预后不良的重要原因。因此,肿瘤侵
袭生长机制成为近年来胶质瘤的研究方向之一。
以往的研究表明,胶质瘤细胞的侵袭性与细胞外基质密切相关。在神经发育
过程中,神经系统的细胞外基质趋于液态,有利于神经细胞的移动和轴突延伸。
成年后,细胞外基质变得不可溶,细胞的移动受到限制,使脑组织的形态和功能
得以维持。在胶质瘤形成过程中,细胞外基质发生类似神经发育中的改变,脑内
微环境有利于肿瘤细胞的迁移和侵袭。蛋白聚糖作为神经系统细胞外基质的主要
成分,其表达调节与胶质瘤生长密切相关。
短蛋白聚糖,脑富含
的透明质酸结合蛋白是年发现的一种硫酸软骨素蛋白聚糖
属于凝集素蛋白聚糖家族,是脑内最富
含的细胞外基质分子之一。存在分泌型和糖基磷脂酞肌醇
锚定型两种,由胶质细胞和神经元合成,具有高度的
组织特异性,其表达只限于中枢神经系统,而周围组织中未见表达。的
表达在胚胎晚期开始出现,随神经发育过程而显著增高,成年以后仅维持低水平
的表达。在中枢神经系统损伤时,表达有明显上调。令人感兴趣的是,
在脑胶质瘤中也有明显增高。体内外研究提示,在胶质瘤中的表
达需要脑内环境团素,并与胶质瘤侵袭性有关。但是胶质瘤中是否由肿
瘤细胞表达尚无组织学证据,二表达量与胶质瘤恶性程度帅关系亦未见报
道,在胶质瘤及其侵袭现象中的作用及其仍不清楚犷介一
本课题采用方法,从人脑星形细胞瘤中克隆了人分泌型的
全长基因,为进行蛋白表达、抗体制备及生物活性研究建立基础并且
采用半定量方法结合原位杂交组织学观察,检测了二在脑胶质瘤
和非胶质来源脑肿瘤中的表达。
一,币裔一———
中文摘要
瓜
件要结晃
、
一、人分泌型的克隆
手术中取新鲜脑胶质瘤标本,置液氮中速冻,异硫氰酸肌一步法提取总
以寡聚为引物对进行逆转录,合成。第一链扩增
片段,检测逆转录反应的效率。
根据的检索结果,设计两对引物引物扩增
,引物扩增分得到长约的片段
和长约的片段。利用两者重叠区中的限制性内切酶
位点及引物设计时引入的限制性内切酶和位点,将两段产物分
别插入十质粒的多克隆位点中,经再次酶切、连接,最终得到包含
完整阅读框的。其中有两处点突变突变为,相应的编码氨
基酸仍为亮氨酸突变为,相应的编码氨基酸由谷氨酸变为缘氨酸。
二、在人脑胶质瘤中的表达
以地高辛标记的探针进行原位杂交。光镜下观察
阳性细胞胞浆呈蓝紫色,大小不一,不均匀散在分布,密度明显大于正
常脑组织,显色适度的细胞中可见略呈浅染的异型细胞核,表明为肿瘤细胞。结
果显示所有例胶质瘤标本均有明显的阳性反应,其中一例小脑髓母细
胞瘤中可见肿瘤浸润部位呈强阳性反应,而邻近的正常皮层则无阳性细胞对照
组例非胶质源性脑肿瘤和脑转移瘤均未见到阳性反应。提示是
由胶质瘤细胞表达的,并且具有高度的特异性,这是目前发现的脑肿瘤相关基因
蛋白中特异性最高的。
采用半定量方法,以为内参照检测在脑肿瘤
中的表达。结果显示例胶质瘤中阳性率为,平
均相对表达量为,对照组例非胶质源性脑肿瘤和脑转移瘤表达量均为
表明在人脑胶质瘤中具有高度特异的表达。在级星形细胞瘤中,
的相对表达量分别为犯、土,各级别星形
细胞瘤之间无显著差异,提示表达量与星形细胞瘤的恶
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主要结论
人脑胶质瘤中是由胶质瘤细胞表达的。
一
一在人脑胶质瘤细胞中的表达具有高度的特异性。
三
房表达量与星形细胞瘤的恶性程度无关。
关
与胶质瘤的研究刚刚开始,对于指导临床诊断、治疗
和估计预后的作用有待进一步阐明。由于神经系统肿瘤在组织起源和病理形态上
的复