《仪器分析》第八章 液相色谱分析.ppt

文档介绍：液相色谱法
了解液相色谱法的优点及适用范围
理解常用检测器原理、优缺点及适用范围
理解各种分离方式的原理、适用的分析对象及选择原则
理解超临界流体色谱法的原理、优缺点及适用范围
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HPLC与GC的区别：
GC流动相惰性，HPLC流动相与组分有作用
HPLC一般在室温下进行、GC多在高温下进行
应用范围－全部色谱分离对象的20％GC，HPLC约占80％
HPLC更适合于制备
1）液体的扩散系数比气体的小倍左右；
2）液体粘度比气体约大100倍；
3）液体表面张力比气体大104倍；
4）液体密度约大1000倍；
5）液体比气体不可压缩。
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1 固定相和流动相
（1）固定相
按照承受压力来分：
刚性固体－硅胶，耐高压，表面可键合各种功能团
硬胶－聚苯乙烯与二乙烯基苯交联而成，承压能力低，主要用于离子交换和尺寸排阻色谱
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按照孔隙深度来分：
表面多孔型－实心玻璃外面覆盖一层多孔活性物质，如硅胶、氧化铝、离子交换剂和聚酰胺等，厚度1－2m，以形成无数向外开放的浅孔。
全多孔微粒型－由直径为10-3数量级的硅胶微粒凝聚而成，颗粒细，孔浅，相对死体积小，出峰快，柱效高，但需要更高的操作压力。最大允许进样量比表面多孔型大5倍
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（2）流动相
纯度高
粘度低
化学稳定性好
沸点高于55ºC
溶剂要完全浸润固定相
与检测器匹配
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2 高效液相色谱仪
1）储液器；
2）脱气器；
3）高压泵；
4）进样器；
5）色谱柱；
6）检测器。
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主要部件：
储液器－耐腐蚀、配2m镍合金过滤器
脱气装置－氦气鼓泡来驱除溶在溶剂中的气体
高压泵
输送流动相，压力几Mpa至数十MPa。
无脉动或者脉动很小
流量稳定可调、耐腐蚀、密封性好
恒压泵：压力恒定，泵腔体积大，流量随外界阻力改变而改变，逐渐被恒流泵取代
气动放大泵
恒流泵：流量恒定
往复活塞泵、螺旋传动注射泵
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梯度洗脱装置
类似于气相色谱中的程序升温
两种、三种或者四种溶剂按照比例进行混合，进行二元、三元、四元梯度淋洗
优点：改善峰形、提高柱效、分析时间减少；
缺点：更换流动相达到平衡的时间需要更长
常采用低压梯度:
一台高压泵, 通过比例调节阀,将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。
或者： 利用两台高压输液泵，将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室，混合后进入色谱柱。
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进样器
高压进样阀－用微量注射器将样品注入样品环管（10L到2mL）
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色谱柱
色谱系统的心脏
优质不锈钢管，内壁光洁平滑
接头死体积尽可能小
为了保护色谱柱不被污染，有时候需要在分析柱前加一根短柱，称为卫柱。为了防止由于卫柱而过分增加压力，在卫柱中使用的颗粒大小约10－30 m。
柱体为直型不锈钢管，内径1～6 mm，柱长5～40 cm。发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。
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