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透析袋原理分子量的选择使用方法步骤.docx

上传人:qiang19840906 2021/7/28 文件大小:22 KB

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透析袋原理分子量的选择使用方法步骤.docx

文档介绍

文档介绍:透析袋原理、分子量的选择、使用方法步骤
透析袋原理
自1861年发明透析方法至今已有一百多年。透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内。
分子量的选择
透析是一个简单的扩散过程,溶质中小分子物质从高浓度溶液通过半透性膜扩散到低浓度溶液中,直至渗透压达到平衡。由于多孔膜的选择性,使得溶质中小分子物质可以通过,而较大物质则被截留,从而分离出不同大小分子量的物质,依据分子量大小截留,可高效用于分离工艺,改变或控制透析的条件,可在多种透析应用中得到预期效果,通过截留分子量(MWCO)可使目标分子得到分离。所以透析袋分子量的选择就决定了实验的成败。这篇文章就详细介绍了如何选择合适的透析袋。
透析膜的材质
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,主要有再生纤维素(RC)、纤维素酯(CE)、聚偏二***乙烯(PVDF)。但随着生物技术发展,对透析袋处理样品更多更严格的要求,根据生产工艺有可以分为标准膜和生物技术级膜。
生物技术纤维素酯(CE)膜
生物学惰性和超纯的生物技术CE膜,用于带电荷分子的分离及大分子纯化。生物技术CE膜对条件及溶剂要求较高。一般而言,CE膜能够抗弱的或稀的酸碱溶液和轻微乙醇,MWCO只有轻微改变。**直接与有机溶剂接触会破坏CE膜。生物技术CE膜能在pH2-9与4-37℃下使用。即用透析装置中也可使用CE膜。
生物技术再生纤维素(RC)膜
生物技术RC膜通过再生过程制得,物理抗性与化学相容性得到改良,具有与生物技术CE膜一样高纯度与均一的MWCO。RC膜能够与高浓度的弱酸碱、低浓度的强酸碱、大多数醇类及一些温和的或低浓度有机溶剂共用,**直接与强极性或有机溶剂接触会破坏RC膜。生物技术RC膜能在pH2-12与4-60℃条件下使用。
生物技术聚偏二***乙烯(PVDF)膜
疏水、惰性及无电抗性,生物技术PVDF膜是实验室透析的革命性进步,能够耐极端高温(130℃)及溶剂条件。只有生物技术PVDF膜能够经受与大多数的酸碱(包括***)和大多数的有机溶剂(包括DMF)直接接触,**PVDF膜还具有独特的高温高压蒸汽灭菌的能力,可热封进行样品分装。
透析膜的选择
1.   选择合适的分子截留量(MWCO):由于透析膜由海绵状横向耦合的聚合物材料构成,截留性能间接的由孔径等级即截留分子量(MWCO)表示,截留率90%的溶质分子大小可更精确的表示膜的MWCO。然而,溶质的渗透性亦取决于分子形状、水合度、离子电荷与极性,推荐选择膜的MWCO为欲截留物质分子量的一半,两倍于透过物质的分子大小。
2.  选择合适的形状:根据需要,最大程度的方便操作及样品回收。
3.  选择合适的膜:成功进行透析分离的关键是在适当的条件下选用最合适的膜。选择时可参照下列:
o    根据目的选择等级(生物技术或标准);
o    根据溶液的化学特性选择膜材质(CE、RC或PVDF);
o    根据使用方法选择产品类型(管状、一次性或片状);
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