文档介绍：人表皮生长因子elisa试剂盒使用方法
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围： 96T
25pg/ml-480pg/ml
使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本表皮生长因子（EGF）含日 Mo
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人表皮生长因子（EGF）水平。用纯化的人表皮生
长因子（EGF）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入表皮生长因子（EGF）,再与HRP标记的表皮生长因子（EGF）抗体结合，-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的表皮生长因子（EGF）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人表皮生长因子（EGF）浓度。
试剂盒组成
1
30倍浓缩洗涤液
20ml X 1 瓶
7
终止液
6ml义1瓶
2
酶标试剂
6ml X 1 瓶
8
标准品(960pg/ml)
X1 瓶
3
酶标包被板
12孔X 8条
9
标准品稀释液
X1 瓶
4
样品稀释液
6ml X 1 瓶
10
说明书
1份
5
显色剂A液
6ml X 1 瓶
11
封板膜
2张
6
显色剂B液
6ml X1/瓶
12
密封袋
1个
标本要求
.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤
.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
480pg/ml
5号标准品
J50N的原倍标准品加入150川标准品稀释液
240pg/ml
4号标准品
150p的5号标准品加入150 |xl标准品稀释液
120pg/ml
3号标准品
15印的4号标准品加入150川标准品稀释液
60pg/ml
2号标准品
1150H的3号标准品加入150川标准品稀释液
30pg/ml
1号标准品
150J1的2号标准品加入150川标准品稀释液
.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50吨待测样品孔中先加样品稀释液40叫然后再加待测样品10川（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸僧水30倍稀释后备用
.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
.加酶：每孔加入酶标试剂50）11,空白孔除外。
.温育：操作同3o
.洗涤：操作同5o
.显色：每孔先加入显色剂A50 pl,再加入显色剂B5O|1I,轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
.终止：每孔加终止液50111,终止反应（此时蓝色立转黄色）。
.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（