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菠菜色素的提取和色素分离
曾丽兰
(山西大学化学化工学院山西太原030006)
摘要:
在用抽滤法提取色素的过程中,由于抽滤时不好控制,非极性溶剂难免会被抽去,且在几次转移中损失较多,程序繁杂•用浸泡法操作简便 易行,损失少,产率高。故在实验中采取了浸泡法提取色素,使用薄层色谱、柱色谱对叶绿素、胡萝卜素和叶黄素进行了分离。薄层层析时 使用了石油醚-丙酮=8:2,石油醚-乙酸乙酯=6:4的两种不同展开剂,对比展开效果。在柱层析时,用不同洗脱剂分离得到不同物质,结果证 明石油醚-丙酮=9:1做洗脱剂分离胡萝卜素效果最好。将得到的胡萝卜素进行紫外光谱测定,检验实验成果。
关键词:菠菜色素;提取;分离 ;胡萝卜素;紫夕卜光谱测定
绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素(绿)、胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素 a(C55H72O5N4Mg和叶绿素b(C55H70O6N4Mg),差别仅是a
中一个甲基被b中的甲酰基所取代。它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物,是植物进行光合作用所必需 的催化剂,也是食用的绿色色素,可用于糕点、饮料水等中,添加于胶姆糖中还可消除口臭。植物中 a的
含量通常是b的3倍。尽管叶绿素分子中含有一些极性基团,但大的烃基结构使它易溶于石油醚等一些非 极性溶剂。
胡萝卜素(C40H56是具有长链结构的共轭多烯。它有三种异构体 a —,3 —,和y —胡萝卜素,其中
B —异构体含量最多,也最重要。生长期较长的绿色植物中,异构体中 3 —的含量多达90%。3 —具有维
生素A的生理活性,其结构是两分子维生素 A在链端失去两分子水结合而成。生物体内, 3—体受酶催化氧
化即形成维生素A。目前,3—体可作为维生素A使用,也可作为食品工业的色素, 3 一胡萝卜素还有防癌
功能。
叶黄素(C40H56O2是胡萝卜素的羟基衍生物,在光合作用中能起收集光能的作用。在绿叶中通常是 胡萝卜素的两倍。较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
由此可见,叶绿素等天然色素有广泛的用途,对于色素的提取与分离就显得很重要了•本实验就提取 和分离做了相关的研究。
仪器:研钵、分液漏斗、显微载玻片、毛细管、层析柱 (20 X 10 cm)、UV-240紫外分光光度计
试剂:石油醚、乙醇(95%)、菠菜叶、丙酮(化学纯)、乙酸乙酯(化学纯)、无水硫酸钠、硅胶 G中性氧 化铝(150目〜160 目)
在研钵中放入10 g新鲜的菠菜叶,加入20 mL3: 2(体积比)石油醚一乙醇混合液,适当研磨 (不要研成 糊状,否则会给分离造成困难),用倾析法将提取液转移到分液漏斗中,每次用 10mI水洗涤两次,以除去萃
取液中的乙醇。洗涤时要轻轻旋荡,以防乳化。弃去水乙醇层,石油醚层用无水硫酸钠干燥,干燥后滤入 小圆底烧瓶,在水浴上蒸发浓缩至大约 I mL。
取四块显微载玻片,硅胶 %羧甲基纤维素钠调制后制板,在室温下晾干后在 110° C活化1ho
选取效