文档介绍：自身免疫性感音神经性聋豚鼠子代的内耳功能与形态学研究
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［摘要］目的：观察自身免疫性感音神经性聋（ASNHL雌性豚鼠子代内耳听觉生理功能及组织结构病理变化，探讨内耳自身免疫因素与子代内耳听觉损伤的相关性。方法：采用同种粗制内耳抗原（CIEAgs）免疫，造成雌性豚鼠ASNHL妊娠后持续抗原强化免疫，对其所产子鼠进行相关指标测试和观察，包括听神经复合动作电位阈值、幅值和耳蜗微音器电位伪阈，血清抗 CIEAgs抗体水平以及内耳病理形态学观察。结果：ASNHL雌鼠的子代36只中
有18只（22耳）出现听力损伤，血清抗 CIEAgs抗体增高，螺旋神经节细胞变性，数目减少，蜗螺旋管内炎性细胞浸润。结论：ASNHL所产子鼠可出现先天
性感音神经性聋和内耳病理损伤，其发生可能与特异性体液免疫有关。
［关键词］先天性感音神经性聋；自身免疫；内耳功能；豚鼠
〜,其中以先天性感音神经性聋（congenital sensori-neural hearing loss , CSNH L 居多。非遗传性 CSNHL勺病因主要有妊娠期病原微生物感染、使用耳毒性药物、高危妊娠等
［1］，但仍有许多CSNH晾因不明。本项目组前期实验研究发现，实验性自身免疫性感音神经性聋（autoimmune sensorineural hearing loss , ASNHL 豚鼠的子代中部分出现先天性聋［2］。本研究旨在通过观察自身免疫性感音神经性聋雌性豚鼠所产子代内耳听觉功能及组织结构病理变化，进一步探讨自身免疫因素导致先天性聋的作用及其机制。
1对象和方法
动物健康白化豚鼠70只，由南京医科大学医学实验动物中心提供，雌性50只，雄性20只，体重400〜450g,耳郭反射阳性，耳镜检查排除中耳疾患。
实验方法
实验设计将雌鼠随机分为两组，第1组40只，首次免疫每只按
? （） -1 粗制内耳抗原（crude inner ear antigens , CIEAgs）与等量完全弗氏佐剂乳化后于豚鼠右后足垫和背部多点皮下注射，以后每隔2 周，? （） -1与等量不完全弗氏佐剂乳化后按上述方
法强化免疫；第2组10只，? L-1 ,免疫方
法同第 1 组。免疫 3 次后进行听力测试，并以第 2 组听神经复合动作电位
（cAP） N1波阈值、幅值和各频率耳蜗微音器电位（CM伪阈的均数加两倍标
准差作为听力损伤的标准，任一指标异常判定为听力损伤，从而确定第 1 组中
产生的ASNHL真型动物共14只，交配妊娠后持续强化免疫，其子代 36只作为实验组，第 2 组雌鼠的子代 18 只作为对照组。
CIEAgs 制备活体断头，显微分离并取出豚鼠膜迷路（包括基底
膜、螺旋韧带、半规管、椭圆囊和球囊），经超声粉碎、匀浆、离心（ 1500r? min -1 , 5min）,取上清液，在紫外分光光度计下分别测 280、260nm的吸光度（ A 值），计算其蛋白含量，分装后低温干燥，制成干粉备用。
耳蜗电图检测母鼠第3次免疫后2周、子鼠出生后2〜3周进
行。采用面神经管电