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液相色谱维护柱子使用及保养(八).ppt

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液相色谱维护柱子使用及保养(八).ppt

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液相色谱维护柱子使用及保养(八).ppt

文档介绍

文档介绍:液相色谱实用技术 色谱柱的使用和保养
色谱柱的选择
非极性或极性较小的样品可用一般的C18柱
酸碱性的化合物建议选用填料经封尾钝化过的C18柱,PH范围2-9〔12〕
糖类,氨基酸,有机酸,多环芳烃,GPC有专用柱
? 超快速柱子-填料粒度<2µm
键合相色谱柱
以硅胶为基质,通过化学键合方式把碳十八、碳八、***基等基团联在基质上作为固定相。这种固定相要占所有柱填料的60-70%
优点∶
固定相稳定,不易流失
应用广泛,可使用多种溶剂
消除硅羟基的不良影响
缺点∶
pH值不能小于2或大于8
同样填料,各种牌号色谱柱不尽相同
反相HPLC柱〔C18〕的性能
常规C18填料的稳定性
硅胶基质填料
pH范围:2-8
pH值大于7时 键合相粉碎或溶解
pH值小于2时 键合相的化学键断裂
经常用缓冲液
固定相降解
填料新的键合技术
- PH范围 2-12
- 稳定性好,使用寿命长
良好的色谱实验****惯
拿到一根新色谱柱时,先测柱效
保留在新色谱柱上测得的色谱图,并记录条件
定期检测柱效
色谱柱的使用及操作
流动相的转换
特别是GPC柱
流速(压力)的变化幅度
温度的变化幅度
专用色谱柱∶样品及溶剂的要求
色谱柱的保养〔一〕
样品方面
除去微粒及杂质
了解样品在流动相中的溶解度
如样品的溶剂不是流动相,一定要用流动相试溶解度,防止其在流动相中析出
了解样品与色谱柱的基质/填料是否相互作用

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