文档介绍：CFU CFU (Colony-Forming Units) 经培养所得菌簇形成单位的英文缩写。 cfu:colony formine unit, 菌落形成单位, 将稀释后的一定量的菌液通过浇注或涂布的方法, 让其内的微生物单细胞一一分散在琼脂平板上,待培养后,每一活细胞就形成一个菌落。意思就是每毫升菌液中含有多少单细胞! 传统上就叫“个”。但是,我们知道,一个菌落并不一定是一个细菌所生成,也可能是由一簇细菌( 一个细菌团) 所生成, 这时候再叫“个”就不太准确啦, 准确的叫法就是“菌落形成单位”, 英文缩写“ CFU ”。就像“公斤”和“千克”, 只是叫法不同,数量上没有变化。 cfu 代表“ colony forming units ”。 cfu/mL 指的是每毫升样品中含有的细菌群落总数一显微镜直接计数法(一)目的要求 1 .明确血细胞计数板计数的原理。 2 .掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的方法。(二) 基本原理显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上( 又称计菌器), 于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。目前国内外常用的计菌器有:血细胞计数板、 Peteroff-Hauser 计菌器以及 Hawksley 计菌器等,它们都可用于酵母、细菌、霉菌孢子等悬液的计数, 基本原理相同。后两种计菌器由于盖上盖玻片后, 总容积为 , 而且盖玻片和载波片之间的距离只有 , 因此可用油浸物镜对细菌等较小的细胞进行观察和计数。除了用这些计菌器外, 还有在显微镜下直接观察涂片面积与视野面积之比的估算法, 此法一般用于牛乳的细菌学检查。显微镜直接计数法的优点是直观、快速、操作简单。但此法的缺点是所测得的结果通常是死菌体和活菌体的总和。目前已有一些方法可以克服这一缺点, 如结合活菌染色微室培养( 短时间) 以及加细胞分裂抑制剂等方法来达到只计数活菌体的目的。本实验以血球计数板为例进行显微镜直接计数。另外两种计菌器的使用方法可参看各厂商的说明书。用血细胞计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微生物计数方法。该计数板是一块特制的载玻片, 其上由四条槽构成三个平台; 中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半, 每一边的平台上各列有一个方格网, 每个方格网共分为九个大方格, 中间的大方格即为计数室。血细胞计数板构造如图 l5-1 。计数室的刻度一般有两种规格, 一种是一个大方格分成 25 个中方格, 而每个中方格又分成 16 个小方格(图 15— 2); 另一种是一个大方格分成 16 个中方格, 而每个中方格又分成 25 个小方格,但无论是哪一种规格的计数板,每一个大方格中的小方格都是 400 个。每一个大方格边长为 lmm , 则每一个大方格的面积为 lmm2 , 盖上盖玻片后, 盖玻片与载玻片之间的高度为 ,所以计数室的容积为 ( 万分之一毫升)。计数时,通常数五个中方格的总菌数,然后求得每个中方格的平均值,再乘上 25或 16,就得出一个大方格中的总菌数,然后再换算成 lml 菌液中的总菌数。设五个中方格中的总菌数为 A ,菌液稀释倍数为 B ,如果是 25 个中方格的计数板,则 1mL 菌液中的总菌数=A/5 × 25× 104 × B=50000A ?B (个