文档介绍：普通生物学实验(动物、植物)
实验一(1) 普通光学显微镜及其使用
一、 实 验 目 的
了解普通光学显微镜的构造及其原理，并熟练掌握其操作方法。
二、 实 验用品
普通复式光学显微镜、载玻片、盖玻片、滤纸、擦镜纸。
三、 实验原理和方法
普通光学显微镜从构造上可分光学、机械和电子三大系统。
1、显微镜的光学系统
光学系统通常由物镜、目镜、聚光器和光阑组成。
、物镜(objective)
显微镜的质量主要取决于物镜。 物镜种类繁多，性能相差悬殊。物镜的放大倍数用数字表示，
如 4、10、20、40 和 100 等。
干燥系(drysystem)物镜
镜检时，物镜与盖片间，不添加任何液体。如 4X、10X、20 X和40 X物镜都属干燥系，使
用时不加用任何浸液，只以空气为介质，其折射率为 1,所以干燥系物镜的数值孔径小，分辨率
亦低。
浸没系(immersionsystem)物镜
物镜在使用时，前透镜与盖片之间浸满液体。依充添的浸液的不同，主要可分为油浸系 (oil
immersion)和水浸系(water immersion)等类别。最常用的浸没液为香柏油 (cederoil),其折射率为
，与玻片的折射率相近，且不易干涸。使用水浸物镜时加用水，其折射率 。
油浸物镜外壳上刻有： “oil ”、“oel ”、“imm”和“HI”等字样，水浸物镜刻有 “ W ”或“Water"
字样；油、水浸两用物镜则刻上“ oil+w ”字样；甘油浸没物镜刻有“ Glyc ”或“ Glyz”等字样。
、目镜(eyepiece , ocular)
目镜作为影像和肉眼间的放大镜，将物镜映来的影像做第二次放大。同时，目镜作为物镜的 补偿，把物镜残留下的像差给予进一步校正，以提高造像质量。目镜作为投影器，把放大的影像 投射在摄影暗箱的焦平面上。
目镜通常由两片 (组)正透镜组成，上面的透镜叫接目或眼透镜 (eye — lens),它决定倍数和成
像的优劣；下面的透镜叫会聚透镜 (collectivelens)或场镜(fieldpiece),它使视野边缘的成像光线向
内折射，进入眼透镜中，使物体的影像均匀明亮。上下透镜的中点，或场镜下面设有用金属制造 的光阑叫做视野光阑或场光阑 (field stop)。场镜或物镜在这个光阑面造像，在光阑上可装入各种
目镜测微计、十字线玻片和指针等。由眼透镜射出的成像光线基本上为平行光束，并在目镜之上 约10mm处交叉，此交叉点称作出射光瞳。
聚光器(condensers)
聚光器等聚光系统，使来自光源的光线放大，并聚成光束，透过载片照明样品，射入物镜。
聚光器由聚光镜和孔径光阑 (aperture diaphragm)构成。聚光镜属正透镜系统，由一至数片透镜组
成，具会聚作用，把照明光线会聚放大，射向被检样品，进入物镜。孔径光阑位于聚光镜下方， 光阑的孔径可变，以改变照明光束的直径，调节进光量。孔径光阑的开度，即聚光器数值孔径， 左右显微镜的成像质量。物镜的有效数值孔径，其中涵容聚光器的数值孔径，即 ：
物镜的有效数值孔径=物镜数值孔径+聚光器数值孔径 /。
2、 显微镜的照明
普通光学显微镜，普遍采用中心亮视野透射照明法。
照明光源：照明光源以鸨丝灯和卤鸨灯为多。卤鸨灯优于鸨丝灯，为显微镜的主要光源。
3、 光路及成像
显微镜的光路或光程 (light path)即光源照明的通路。光路始于光源灯，光源装在镜座后方的
灯室(lamp housing)内。光源灯丝(S)发出的色光，由聚光透镜集光成束或光锥，经镜座中的视场 光阑(L),投向反光镜， 呈现45。折射向上，入射孔径光阑， 光源灯丝在此平面处第一次成像 (S1)。
透过聚光镜使光线放大、聚集，透射、照明载物台的样品，视场光阑在此平面处第一次成像 (L1),
即在样品聚焦的同时，可见清晰的、缩小的视场光阑的影像。成像光束继而进入物镜，在物镜的 后焦面(rearfocal plane)的平面处，光源灯丝第二次成像 (S2)。成像光束经转折进入目镜，在目镜
的场光阑平面处，视场光阑第二次成像 (L2)。最终，成像光束从目镜眼透镜射出，在目镜的出射
光瞳处，光源灯丝第三次成像 (S3)。视场光阑的第三次成像 (L3)在人眼的视网膜上。在成像系统
中，一个位置的改变，会引起整个成像关系的改变，光源灯前后位置的稍许位移将导致光源成像 位置的变动。 4、放大率(magnification)
显微镜最后形成的物体放大影像，对被检物体的大小比例称为放大率，即像高比物高。放大 倍数以长度计算，而不是以面积或体积计算。
某些显微镜为适应不同需要， 镜筒内装有倍数不同的