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STAT1和H2AX基因shRNA慢病毒载体构建及食管癌细胞体外转染.pdf

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文档介绍

文档介绍:!!!!!!!!!ā研究生签名:强嗨雌章:和蛹二薮学哆领导积:研究生签名:弧脯哲导师签章:删孜翔学位论文使用授权及知识产权归属承诺研究生学位论文独创性声明河北医科大学本学位论文研究所获得的研究成果,其知识产权归河北医科大学所与学位论文主要内容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。文中特别加以标注等内容外,文中不包含其他人已发表或撰写的研究本学位论文在导师蛑傅夹∽的指导下,由本人独立完成。有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表否则,承担相应的法律责任。年本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了成果,指导教师对此进行了审定。太论文由本人独立撰写,文责自负。月日·
/必嬲必录目中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯研究论文虷騭慢病毒载体构建及食管癌细胞体外转染前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯综述信号转导子与转录激活子的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯再舌
虷騭慢病毒载体构建及食管癌细胞体外染中虷趍健⑸湎咦饔们昂蟮鞍字仕胶拖赴内斑点表达的变化,为进一步探讨抑制虷虻鞍妆泶锒方法:根据虷膍蛄校琒选择了.、—.和.;以上质粒均需要经过筒庑蚣ā<ㄕ泛螅H綯虴赴摘要目的:,观察人食管癌细胞.、食管癌一、细胞放射敏感性的影响提供理论基础。的靶序列,分别选择了和的靶序列设计并合成包含正、反义序列的互补单链鄙杓埔桓鑫抟宥哉招蛄小M火后插入载体的舳雍蟛鷓猄.、采用的方法检测虷牡鞍妆泶铮冉纤闹质粒母扇判Ч秆〕鯮干扰效果最佳的质粒,将干扰效果最佳的质粒与慢病毒包装质粒混合物共同转染细胞螅占清并过滤即为病毒液,该病毒液转染和细胞螅捎方法检测转染食管癌细胞中基因和水平及蛋白质水平的变化,并采用激光共聚焦显微镜检测细胞核内虷叩阈纬傻谋浠结果:①成功地将虷雙瓽质粒连接并经细菌转化扩增后,再提取质粒虎赟和染人食管癌细胞珠和后,其目的蛋白表达水平均下降明显,.、..、.—在和猻蛍籹蚿狧猻中文摘要狧、—、——籹甆、一、—籹.—籹猄一、—籹
关键词:食管癌/放射治疗;照射/放射敏感性;砒蛆干扰;疕%和%、%、%、%;猄一、细胞后,其目的蛋白的表达均被明显抑制,成功构建了虷泶镌靥錺猄、.;转染的食管癌细胞后虷鞍妆泶锩飨越档停蚁赴四赟和斑点细胞系较空白对照组分别下降了%、%、%、%和%、%、%、%;在细胞系较空白对照组分别下降了%、%、%、——和慢病毒包装质粒混合物共转染工具细胞细胞,转染后更换为完全培养基,培养螅偈占缓《究粒的细胞上清液,对其浓缩后得到的高滴度慢病毒浓缩液收集上清并过滤为病毒液,该病毒液感染和细胞螅谟ü庀晕⒕迪出现绿色荧光,荧光率达%以上,即为人基因虷鞍椎表达的食管癌细胞株;④,结果发现基因鞍椎捅泶锏氖彻馨㏕转染细胞株在和蛋白水平上分别下降了%和%,基因蛋白低表达的食管癌转染细胞株在和蛋白水平上分别下降了%和%;基因蛋白低表达的食管癌转染细胞株在和蛋白水平上分别下降了%和%,基因蛋白低表达的食管癌转染细胞株在和蛋白水平上分别下降了%和%;⑤用转染的食管癌细胞株应用激光共聚焦显微镜检测细胞核内斑点情况,结果发现派湎哒丈浜退巢砗笙赴四赟和斑点的形成明显减少。结论:采用质粒连接的虷H綯虴的形成明显减少。中文摘要蛍
籹删..Ⅲ,——Ⅲ,—.牒.:①就英文摘要篢篎甦’『—.,—.畇琾甋仉气畇琾猄猻一—...—籐甌籊..●■■』
甌..錋琾瓾猄盢.⑨:②/.④%.⑤赟甋仉订篍英文摘要%,%,%,%ィ%,,.%,%,%,/盯%,/..崞鳷甋琾猄.,—盢琾猄一ィ%,%,%,%%%,%./甿一甌琣../.—.崞鳷篢疭、/瘆狧甌疪籸/—;;
虷騭慢病毒载体构建及体外转染食管癌细胞株损伤部位,引起细胞周期阻滞,达到修复鹕说哪康难。研究表明降我国食管癌发病率和死亡率较高,且大多数患者就诊时已属中晚期失去手术机会

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