文档介绍：中文摘要
目的仲着显微手术技术及设备的不断完善和发展,白内障囊外
摘除术及人工晶体植入术的许多术后并发症明显减少,而后发性
白内障即手术后发生的晶体后囊膜混浊
己经成为主要并发症。目前治疗的手段主要
是激光或手术切开晶体后囊膜但术后效果不能令人满意,所以国
内外在应用药物抑制晶体上皮细胞增殖方面作了多方面的探索。
这些药物主要集中在拉代类和抗肿瘤类,但大多数由于对眼内
其它正常组织存在副损伤而未能在临床上普及。
维甲酸是维生素在体内自然产生的衍生物,分为全反式和
顷式两种同分异构体,在高温及光照下,前者向后者转化。多年
来维甲酸被认为是一种防癌、治癌的药物,对白血病的疗效己经
肯定。在皮肤科被成功地应用于抑制瘫痕形成。高浓度维甲酸能
明显抑制表皮细胞增殖并能维持各种上皮的正常结构。多数学者
认为它能与细胞浆的维甲酸蛋白结合形成复合物,再与
核上的维甲酸受体结合,维甲酸类化合物通过激活其核
受体使其构象发生改变,使其具有与基因调控区域上的特定
序列特异性结合的能力,从而调控基因表达,在细胞的生长、分
化、细胞生理凋亡等方面起重要作用。
在眼科已经应用维甲酸在抑制玻璃体增殖性改变方面取得了
一定的进展。但在预防后发性白内障方面,仅国外等在年
代中期在施行了白内障手术的个体灵长类动物上将维甲酸等几种
药物注入前房并观察后囊膜的变化,结果认为氨甲喋吟和维甲酸
是预防后发障的有效药物,并认为其对眼组织和视神经的毒性轻
微。但其结果没有客观的指标支持,而且实验样本仅为一个,缺
乏细胞培养和大样本的、随机的动物实验的基础研究和床实验
所获得的切实可靠的结果和经验来证明其结论的可靠性
斗一
本课题观察体外原代培养和传代培养的人类晶体上皮细胞
,了解增殖的生物学
特征及组织学变化。
另外,观察不同浓度的全反式维甲酸对传代人类晶体上皮细
胞的抑制作用并找出合适的药物作用浓度范围以及药物抑制作
用的半效抑制量
体检验全反式维甲酸对传代的贴壁有否抑制作用。
法将取材于白内障摘除及人工晶体植入术中的人类晶体前囊
膜
存放在无菌条件下返回实验室。在显微镜下按部位分割成中央
区和周边区共片,分别贴附在孔培养板底层后置于
的孵箱行原代组织培养,同时应用倒置相差显微镜观察并记
录原代培养的前囊膜下上皮细胞生长规律和生物学特征并按一定
浓度传代。
传代培养细胞经计数后培养小时,再加入含浓度分别为
的全反式维甲酸的完全培养基作为用药
组,同时设空白对照组。继续培养及小时后进行活细胞计
数并与空白对照组对比,进行统计学分析,观察全反式维甲酸对
的抑制作用各用药组间再进行两两对比找出合适的药物
作用浓度。绘制不同浓度维甲酸对的生长抑制曲线并求出
其半效抑制量,最后进行统计学分析。
在传代细胞接种后,立即加入含全反式维甲酸浓度为其小
时。,的的完全培养基为作用组,对照组加入完全培养基。
培养小时后分别消化贴壁细胞并计数,进行统计学分析。
结果在原代组织培养中,接种的前囊膜植片在贴壁后小时
植片边缘即有新生的细胞生长。新生的晶体上皮细胞均发生于前
囊膜植片的边缘并呈外生性生长,不同区域的植片周围均有
以此方式生长。新生的细胞呈团簇样散在生长形成“细胞岛”样
改变,它们之间通过细胞搭桥式生长相连并在天后长成连
续剿丢
传代的悬浮细胞则在接种后小时开始贴壁,通常在周后
长成连续单层。婴幼儿可以传代,岁以下成人可传代,
而岁以上老人则只能传代细胞即脱落。
与空白对照组相比,各全反式维甲酸作月」组的细胞计数均
与空白对照组相比在统计学上有意义。从浓度为的作用
组开始,其抑制作用即在统计学上有差异。各个用药组组内比较,
作用小时及小时的“两组与相应的
组对比差异不显著。全反式维甲酸在小时及小时的分
别为」和动,两者在统计学上差异显著。
在验证全反式维甲酸对传代贴壁的影响的实验中,
含全反式维甲酸浓度为其。的的作用组在小时后与空
白对照组比较,两组的贴壁数在统计学差异显著少一一一
结论本实验首次应用全反式维甲酸作用于体外培养的人类晶体
上皮细胞来检验其对增殖和贴壁的抑制效应。
结果表明全反式维甲酸具有抑制体外培养的增殖和贴
壁的作用。抑制增殖作用的有效浓度为。全反式维甲
酸对的抑制增殖作用以低剂量持续作用较佳。抑制贴壁作
用的浓度则更低。
人类晶体上皮细胞在体外培养中由于接触抑制的解除而发生
增殖性行为。在体外增殖能力有限,传代次数随着年龄增
加而减少。
关键词全反式维甲酸,
原代培养传代培养
那

勿妙

勿