文档介绍：绪论
植物生物技术的概述：指生物技术在植物上的应用,包括植物组织培养技术、人工种子、细胞工 程、基因工程等多个生物技术，主要是指植物基因工程和与之相关的植物组织细胞培养技术、分 子标记育种技术等。
生物技术的产生和发展：现代生物技术是以20世纪70年代DNA小组技术的建立为标志的。发 展迅速
植物生物技术的展望：植物生物技术被普遍认为是未来人类解决资源短缺不可或缺的技术,也是 争取农产品高附加值的重要技术手段。
What is Biotechnology什么是生物技术：应用该技术通过添加来自另一生物的基因来修饰生物的 生物功能
第一章组织培养实验室建设与操作技术
标准的组织培养实验室包括:洗涤室（准备室）、配置室、灭菌室、接种室、培养室、观察室等。
组织培养所用到的器具:银子类、剪刀类、组培瓶、各类器皿、量筒、移液管、试剂瓶、容量瓶、 试管以及移液管架、酒精、玻璃棒、
培养基的配制:无机营养成分、有机营养成分、碳源、激素、琼脂、水。其中无机营养包括大 量元素、微量元素。有机营养包括氨基酸和维生素。碳源有蔗糖、葡萄糖、果糖，以蔗糖为主。 激素包括生长素和细胞激动素
植物生长调节物质:生长素：■引噪乙酸、NAA、2,4-D；细胞分裂素：控制植物细胞分化（比例高 时一一产生芽，比例低时一一产生根）、赤霉素、脱落酸
作用：促进细胞生长和细胞分裂；
-诱导受伤组织表面细胞恢复分裂能力；
-形成愈伤组织，促进生根；
-与一定量的细胞分裂素配合共同诱导不定芽的分化、侧芽的萌发与生长、胚状体的诱导。
根据培养物的培养过程,培养基分为：初代培养基：用来第一次接种外植体的培养基；继代培养 基：用来接种继初代培养物的培养基。根据其作用不同，培养基分为：诱导培养基；增殖培养 基；生根培养基。
基本培养基:主要有 MS、White、N6、B5、改良 MS、Heller、Nitsh、SH、Miller 等。
完全培养基:基本培养基的基础上，根据试验的不同需要，附加一些物质，如生长调节物质和其 他复杂有机物质等。
培养基的配制:计量、移液、取琼脂蔗糖备用、融化、混合、调pH、分装、包扎、培养基的灭
灭菌工作的重要性:预防感染杂菌的需要；消除生物污染的需要；防腐与保存的需要
灭菌的方法:a、物理方法：干热、湿热、过滤（）紫外灯、超声波等。
b、化学方法：使用灭菌剂或抗菌素，如酒精、次氯酸钠、升汞、漂白粉、高镒酸钾、双氧水、 福尔马林等O
干热灭菌:适用于玻璃器皿和金属器械的灭菌。操作方法：150°C、40min或120°C、120min,
如果发现芽抱杆菌,160°C 、 90〜120mino
湿热灭菌:适用于各种器皿、培养基、器皿、蒸儒水、棉塞、纸等。121°C维持20〜30min。注 意点：加足水、排尽气、气压降到0时，才能开盖
过滤灭菌:培养基的灭菌一般用高压高温处理，但如果培养基中某些成分遇到高温分解（如某些 生长调节剂GA3、玉米素等），就需要过滤灭菌。另外酶、血清等也需要过滤灭菌。灭菌方法： 将生长调节剂或酶配成一定浓度，用注射器注入微孔滤膜虑，^。制培养
基时，现将培养基高压灭菌，待降至50°C左右时，加入适量的激素，然后分装。
射线灭菌：主要是利用紫外灯进行照射,适合实验室空气、操作台等，灭菌时间20〜30min。
15.
火焰灼烧灭I
:用火焰灼烧达到灭菌目的，适用于接种器皿的灭菌。
消毒剂
使用浓度（％）
消毒时间（min.）
效果
残液去除难易
乙醇
70-75
-3
好
易
氯化汞
—1
2〜15
最好
最难
过氧化氢
10 〜12
5〜15
较好
最易
抗菌素
4〜50mgl」
30 〜60
较好
较难
次氯酸钙/纳
9〜10
5〜30
好
易
度
，人为因素（工作人员本身）:.。。
培泰典：洗然压
玫璃聚皿：洗-干兑r干热书j或豚干
污染来源〈
挂秒用凡：用cc\布掠一淫布榇—
，包75%~95%酒精一境
外部向笛：用表冲洗-*化学药刻处独
茎尖培系
加札生素：者春素，利福手
'媒作的空乞：洗削地极95%酒浩擦趣净工作台
用化学次斜美慕
实验器具和材料的准备
用75%的酒精擦拭超净工作台，然后室内及超净工作台用紫外灯杀菌20min-30min。注意：台面上的 用品不要放置太多或重叠放置，以免降低灭菌效果。
关紫外灯、打开风机，过5-10min进入缓冲间，以75%洗手和手臂，更换无菌服、帽子和口罩。进入
接种室。（注：没有特别情况，尽量不要下工作台）
外植体和