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湖南大学学位论文原创性声明月版权使用授权书辍C鱫日期:.月本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名日期:.本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权湖南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于⒈C芸冢年解密后适用本授权书。⒉槐C芸凇导师签名日期
摘要随着人类活动,尤其是工业生产的发展,重金属污染变得日益严重。重金属是一类典型的环境污染物,具有致癌、致畸等危害,因而对人类健康和自然环境造成了极大威胁。近年来,利用物理化学方法治理重金属污染的的方法取得了很大发展,主要有淋洗法、化学沉淀法、电化学法、氧化还原法、离子交换法、膜技术法、反向渗透法、蒸发治理等方法。但这些方法治理费用高、效率低下、需要大量劳动力、且处理过程缺乏选择性。生物修复技术是指利用动植物和微生物等生物的某些特性来改良重金属污染的措施,相比于物理化学法,其具有有明显的安全性和经济性的优势,因此成为重金属污染修复的潜在技术之一。然而,现阶段制约生物修复这一技术进行实际应用的关键在于如何高效、快速地从自然界中筛选得到具有潜在修复作用的重金属抗性菌株。近期,关于内生菌,特别是重金属超累积植物内生菌与其宿主植物协同处理重金属污染的研究方面取得了明显进展。内生菌是指寄居在植物组织内而不对宿主植物产生伤害的一类微生物,其与宿主植物可能存在共生、互生等多种作用关系。大部分内生菌是通过植物的根围或叶部进入植物体内,部分可能一直存在于植物种子体内。超累积植物是指能在重金属污染土壤中生长良好并能累积大量重金属在其体内的一类特殊植物。重金属超累积植物的另一个功能是作为“过滤器’’,自土壤微生物中筛选有潜在修复作用的重金属抗性菌株,让其定殖于体内以帮助其对抗重金属毒性。基于这一理论,本研究首次提出了快速、高效地从重金属超累积植物中筛选同时具有优良环境适应性和重金属修复能力的菌株用于实际重金属污染的生物修复。首先,本论文在传统植物内生菌分离方法的基础上建立了一种高效、快速的植物内生菌分离方法。与传统方法相比本方法主要应用表面活性剂十二烷基磺酸钠椭参锵宋孛缸魑V参锬谏奶崛≡鋈芗痢Sτ么撤椒ê捅痉法从龙葵、齿果草、蚂蝗七、水鸡仔种参锾迥诜直鹛崛》掷胫参锬谏果表明椭参锵宋孛改芡ü庵参锵宋橹行У靥岣咧参锬谏离效果。随后,利用该方法从镉超累积植物龙葵体内分离获得了株内生菌,其中根内生菌株,茎内生菌株,叶内生菌株。除从茎中分离到的唯一一株内生菌是真菌以外,其他所有内生菌都是细菌。通过检测所有龙葵植物体内重金属镉含量和龙葵内生菌对重金属抗性发现:不同部位分离得到的内生菌对重金属镉的抗性程度不一,从镉含量较高部位分离得到的内生菌其相应的重金属抗性要高于博士学位论文
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从镉含量相对较低部位分离的内生菌的重金属抗性。这表明不同种类的内生菌有可能寄居于植物的不同部位。内生真菌谴语映刍参锪木ブ蟹掷氲玫降奈ㄒ徽婢7肿由物学鉴定表明它属于.。在体外培养条件下,@肔作为生物吸附剂直接吸附废水中的重金属镉,结果表明其理论最大吸附能力高达/,高于绝大多数已经报道的生物吸附剂或者其他类型吸附剂。红外光谱分析发现砻娲嬖诘聂然被③匣Ⅳ腔然Щ旁陲拥生物吸附中起关键作用。具有多种优良重金属抗性的内生细菌谴语映刍参锪恫糠离得到的内生菌。,即:表现出毒物兴奋效应。研究发现,该现象是酶活性异常增高所带来的副作用。诙壑亟鹗衾胱哟嬖谔跫峦ü岣傅幕钚韵虬馀懦鲇卸镜闹亟鹗衾胱樱芰坷玫囊斐T龆嗟贾铝似渖物量的过度增长。在嘌奔淠冢珽芴匾煨缘卮雍ǘ任不同重金属的培养基中分别去除.%的镉,.%的铅,以及.%的铜。在相同条件下灾亟鹗舾跫负趺挥腥魏挝蘸腿コ饔谩6訣コ重金属机理研究表明:能够通过抑制其傅幕盍刺岣咚闹亟鹗粜薷葱率。帕嫉幕肪呈视π院推涓咝У闹亟鹗羧コ芰Γ砻魉诘团ǘ戎亟属生物修复领域具有较好的应用前景。在工业代谢抑制剂琋’.二环己基碳二亚***,趸存在的条件下,%∈焙螅ü直鸱治其镉的总吸收去除浓度和细胞内镉