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乳酸菌镜检方法及显微
镜使用方法
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乳酸菌精简方法及显微镜使用方法
第一部分：乳酸菌镜检可以采用革兰氏染色方法。
第二部分：使用显微镜的油镜进行镜检，下而是具体的染色方法和镜检方法，请参考。
第一部分二乳酸菌革兰氏染色方法
1目的
在乳酸菌发放之前，利用标准的革兰氏染色法对即将发放的乳酸菌
悬液或乳酸菌样品进行检测，观察乳酸菌乳酸菌在显微镜下的形态。
2原理
通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌山于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在墜内，使其仍呈紫色：而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。
3实验用品准备：
灭菌玻片、10-lOOu 1移液器、lO-lOOu 1灭菌移液吸头、lOOul- lOOOul移液器、lOOul-lOOOul移液吸头、接种环、酒精灯、打火机、革兰氏染色液、吸水纸、显微镜、香柏油、擦镜纸、计时器
4操作：
1涂片：取灭过菌的载玻片于实验台上，用移液枪吸取10ul待检样品滴在载玻片的中央，用烧红冷却后的接种环将液滴涂布成一均匀的薄层，涂布面不宜过大。
2干燥：将标本面向上，手持载玻片一端的两侧，小心地在酒精灯上高处微微加热，使水分蒸发，但切勿紧靠火焰或加热时间过长，以防标本烤枯而变形。
固定：固定常常利用高温，手持载玻片的一端，标本向上，在酒精灯火焰处尽快的来回通过2-3次，共约2-3秒种，并不时以载玻片背面加热触及皮肤，不觉过烫为宜(不超过6 (rc)，放置待冷后，进行染色。
初染：在涂片薄膜上滴加草酸银结晶紫「2滴，使染色液覆盖涂片，染色约
Imino
水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。
媒染：用100-1000U1移液枪吸取约300U1碘液滴在涂片薄膜上，使染色液覆盖涂片'染色约Imino
水洗：斜置载玻片，毎練冰龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无斜置载玻片，
脱色：滴加95%乙醇脱色，至流岀的乙醇不现紫色为止，大
约需时20-30S,随即水洗。
复染：在涂片薄膜上滴加沙黄染液「2滴，使染色液覆盖涂片，染色约Imirio 10水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。
11干燥、观察：用吸水纸吸掉水滴，待标本片干后置显微镜下，用低倍镜观察，发现U 的物后滴一滴浸油在玻片上，用油镜观察细菌的形态及颜色，紫色的是革兰氏阳性菌，红色的是革兰氏阴性菌。
5清场
实验结束后，将显微镜油镜上的残留的香柏油用擦镜纸轻轻擦去，将载物台移至最底处，将灯光调到最暗并将其关闭电源，拔下电源