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经颈椎关节解剖学论文.docx

上传人:仅仅三声 2021/8/23 文件大小:19 KB

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经颈椎关节解剖学论文
一、方法

实验于2013年4~5月在连云港市第一人民医院麻醉科、疼痛科、病理科、影像科、连云港市临床医学实验中心与神经外科实验室完成。健康清洁级三、四月龄家兔8只,雌雄各半,~,由徐州医学院动物中心提供[许可证号:SCXX(苏)2003~0003]。动物置于安静、温暖(15~20℃)、避强光的环境下正常喂养48h,禁食24h后进行实验。实验中对动物的处置符合中华人民共和国科学技术部颁布的《关于善待实验动物的指导性意见》的相关要求。仪器与试剂:单层螺旋CT机(SiemensEmotion)、CM1100冰冻切片机(Leica,Germany)、ZX-004荧光显微镜,PM-30照相系统(Olympus,Japan)、丙泊酚(商品名:得普利麻;200mg/支,AstrZeneca,UK)、***(,江苏恒瑞医药股份有限公司)、核黄(Sigma,USA)。

核黄逆行神经追踪8只家兔按随机数字表法分为2组。经耳缘静脉注射丙泊酚(2mg/kg)和***(2mg/kg)麻醉家兔后,在CT引导下经双侧C3/4关节突关节分别注射荧光逆行神经追踪剂核黄50ul(1g/L),进行神经追踪。组织标本制备及形态学观察:分别于术后18、36h再次麻醉家兔,经心脏依次灌注生理盐水300~400ml、20g//L磷酸缓冲液()500~800ml、含50g/L蔗糖的磷酸缓冲液(4℃)500ml。随后分别取双侧颈胸椎脊神经节、双侧颈胸交感神经节、肠系膜下神经节、脊髓、颈椎间盘纤维环、颈椎间盘髓核、颈椎关节突滑膜、肩关节滑膜,在含200g/L蔗糖的磷酸缓冲液(4℃)中过夜后,行连续冰冻切片,分别做成2套,一套20um蒸馏水贴片,直接在OlympusZX-004荧光显微镜下观察,拍摄光学相片。另一套7um行苏木精-伊红染色后置于荧光显微镜下,观察有无新的发现。


寻找各组织荧光标记的神经细胞、荧光标记密集的神经末梢部位。
二、结果
、胸脊神经节、双侧交感神经节及肠系膜下神经节发现标记细胞;在脊髓前、后角未见到标记细胞;肩关节滑膜、颈椎间盘纤维环、颈椎间盘髓核、颈椎关节突滑膜发现明显的荧光密集区;苏木精-伊红染色可见上述部位荧光强度明显增强,各荧光密集区与直接在荧光显微镜下所见相同。

颈胸脊神经节标记神经细胞明显减少或消失,交感神经节及肠系膜下神经节标记神经细胞与18h基本相似,颈椎间盘纤维环、颈椎间盘髓核、颈椎关节突关节滑膜、肩关节滑膜荧光密集区的部位与神经逆行追踪18h时基本相同,但荧光强度增强。

三、讨论
实验模拟临床在颈椎关节突滑膜注射核黄观察临床上经颈椎关节突滑膜感受器治疗颈肩痛的神经通路。实验进行神经通路研究的依据是核黄可被神经末梢特异性吸收,并沿轴浆运输到达神经元的细胞体,使细胞核在一定条件下呈黄色的荧光,而胞