文档介绍：第九章基因工程和基因组学
转基因烟草
来自荧火虫的荧光素酶
04-5-16 第九章基因工程与基因组学 1
第一节第一节
基因工程基因工程
一基因工程概述:
广义遗传工程包括:
生化工程蛋白质工程细胞工程染色体工程
细胞器工程基因工程及酶工程等
狭义遗传工程是指:
基因工程(重组DNA技术)
果蝇转基因
β–半乳糖苷酶
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第一节
基因工程
.概念
基因工程在分子水平上采取工程建设方式Î 按照
预先设计的蓝图Î 借助于实验室技术将某种生物的基因或
基因组转移到另一种生物中去Î 使后者定向获得新遗传性
状的一门技术
基因工程技术的建立使所有实验生物学领域产生巨大
的变革
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第一节
基因工程
2. 发展
1971年 Smith等人从细菌中分离出的一种限制性酶酶切病毒
DNA分子标志着DNA重组时代的开始
1972年 Berg等用限制性酶分别酶切猿猴病毒和l噬菌体DNA
将两种DNA分子用连接酶连接起来→得到新的DNA分子
1973年 Cohen等进一步将酶切后
的DNA分子与质粒DNA连
接起来并将重组质粒
转入E. cloi 细胞中
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第一节
基因工程
1982年美国食品卫生和医药管理局批准用基因工程在
细菌中生产人的胰岛素投放市场
1985年转基因植物获得成功
1994年延熟保鲜的转基因番茄
商品生产
1996年克隆羊诞生
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第一节
基因工程
2001年我国的转基因农作物和林木已达22种其中
转基因棉花大豆马铃薯烟草玉米花生菠菜
甜椒小麦等进行了田间试验转基因棉花已经大规模
商品化生产
转基因
棉花
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第一节
基因工程
3 内容
从细胞和组织中分离DNA
限制性内切酶酶切DNA分子制备DN***段
将酶切DNA分子与载体DNA连接Î构建能在宿主细胞内
自我复制的重组DNA分子
把重组DNA分子引入宿主受体细胞Î复制
重组DNA随宿主细胞的分裂而分配到子细胞Î建立无性繁
殖系(Clone)或发育成个体
从细胞群体中选出所需要的无性繁殖系Î并使外源基因
在受体细胞中正常表达翻译成蛋白质等基因产物回收或
筛选出获得定向的性状变异的个体
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第一节
基因工程
二限制性内切核酸酶
1. 限制性内切酶(restriction enzyme)
一种水解DNA的磷酸二脂酶遗传工程中重要工具
细菌细胞中存在限制修饰系统
限制降解外源DNA 防御异源遗传信息进入的手
段
修饰修饰外源DN***段后保留在新细胞中
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第一节
基因工程
*限制性内切酶EcoR
识别序列回纹对称序列(palindrome) 不同生物的DNA
具有相同识别序列
酶切方式
以交错方式切断
DNA双链产生二个
相同的单链粘性末端
重组过程
两种片段在适宜
条件下可经碱酸二
脂链连接成重组
DNA分子
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第一节
基因工程
限制性内切酶的命名
根据其来自的生物名称用英文字母和数字表示
. EcoRI 来自Escherichia coli
. Hind 来自Haemophilus influenzae
限制性内切酶的类别
第类酶切割部位无特异性
如EcoB(大肠杆菌B株) EcoK(大肠杆菌K株)分子量较
大(约300000) 作用时需ATP Mg++等辅助因子
第类酶切割部位有特异性
如EcoRI(大肠杆菌) Hind (嗜血杆菌) 分子量较
小(约20000 100000) 作用时需Mg++存在
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