文档介绍：_6_ BSA CD4 缩略词表 bovine serumalbumin 牛血清白蛋白 duster designation ofmonoclonal 单克隆抗原决定簇4 antigens 4 CD8 clusterdesignation ofmonoelonal 单克隆抗原决定簇8 CFA F8S FeM antigens plete freund’Sadjuvant fetalbovine serum flowcytometry HGXPRT The purine salvage enzyme HRP IFA IgC PBS hypoxanthine guanine xanthine phosphoribosyl transferase horseradishperoxidase plete freund’Sadjuvant immunoglobulin G phosphate—buffered saline 17NL plasmodium,yoelii 7NL 7XL plasmodium,yoelii 7XL 。黄嘌呤磷酸核糖转移酶辣根过氧化物酶不完全福氏佐帮免疫球蛋蛊G 磷酸盐缓冲液约氏疟非致死株约&疟致死株独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任。学位论文作者签名l奠曜签字同期: 2。。8年5月25日学位论文使用授权书声明本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名:亟艰导师签名.≯‘签字同期: 2008年5月25日签字日期:2008年5月摘要疟疾目前仍然是严重威胁人类健康的寄生虫病,据WHO最新估计, 全球仍有41%的人生活在疟疾流行区,每年死亡人数达三百万。随着疟原虫及其蚊媒的抗药性日益增强,迫切需要研制高效的疟疾疫苗。但由于疟原虫生活史复杂、抗原变异性大等原因,单价疫苗免疫效果并不理想。因此,研隶《复合多价疫苗成为预防疟疾的一条潜在的有效途径。而多价疫苗应包含疟原虫的多个能够发挥保护性体液免疫应答翻细胞免疫应答作用的抗原表位(T细胞表位和8细胞表位),以更有效地发挥免疫保护作用。但近年来所发现的针对红内期疟原虫感染的保护性抗原,绝大多数是针对保护性体液免疫的抗原。。(hypoxanthine guanine xanthine phosphoribosyl transferase, HGXPRT)。HGXPRT是嘌呤核替酸补救合成途径中的一种酶。这种酶具有高度保守性,在哺乳动物及疟原虫体内均存在,)与嘌呤反应生成嘌呤核营酸。本实验室已利用毕氏酵母系统表达并纯化了恶性疟HGXPRT重组蛋自,本研究在此基础上,检测HGXPRT重组蛋白对约氏疟易感小鼠(C57BL/6小鼠)的免疫原性;对不同约氏疟虫株( 7XL和 )感染的免疫保护作用;建立针对HGXPRT蛋自特异的T细怒晶系,以确定其保护性细胞免疫的作用;从而为疟疾疫苗的研制提供基础资料。为研究HGXPRT重组蛋白的免疫原性,我们将HGXPRT重组蛋囱与完 plete freud’sadjuvant CFA)孚L化并免疫C57BL/6dx鼠,并以不完全弗氏佐剂(plete freud’s adjuvantIFA)孥L化蛋白加强免疫两次,设立小牛血清白蛋白(bovine serum albumin BSA)和PBS组作为对照组,并在每次免疫的前一天尾静脉取血,用酶联免疫吸附试验fELISA)澳《定血清抗HGXPRT重组蛋白抗体滴度;我们还将HGXPRT重组蛋白与CFA 巍纯并免疫Balb/cdx鼠,设立BSA和PBS组作为对照组。加强免疫一次后, 无菌取小鼠脾脏、淋巴结,制备淋巴细胞悬液,通过[3H】标记的胸腺嘧啶掺入法来检测淋巴细胞的增殖;采用流式细胞术分析淋巴细胞的表面分子(CD4,CD8)。 ELISA结果显示:三次免疫的抗HGXPRT蛋白抗体滴度依次升高,至未次免疫时可达1 05以上(×l