铁皮石斛组织培养.ppt

文档介绍：铁皮石斛组织培养
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铁皮石斛的组织培养技术路线
外植体
丛生芽
培养基
生根发育
完整植株
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蔗糖：30g
初代培养基的设计
诱导培养基
+蔗糖3%%【~】
MS母液： I-V50ml,5ml,5ml,5ml 5ml。
激素母液：BA10ml,NAA5ml
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蔗糖：30g
土豆汁150ml
继代培养基的设计
增殖培养基
ml++土豆汁10%~20% 【~】
取MS母液： IV50ml,5ml,5ml,5ml,5ml;
激素母液：BA5ml,NAA2ml
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NAA
BA
IAA
增殖培养将建立的无菌系中的小苗转入增殖培养基中进行增殖培养。增殖培养基以MS为基本培养基，添加不同浓度的生长调节剂BA、NAA、IAA、IBA及土豆汁和香蕉汁等附加物。
土豆汁
香蕉汁
IBA
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蔗糖：30g
香蕉汁：200ml
活性炭：20g
生根培养基的设计
生根培养基
1/2MS+~+香蕉汁20%+%【~】
取MS母液： IV25ml,5ml,5ml,5ml,5ml;
激素母液：NAA2~5ml
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生根培养将丛生芽无菌操作切下单株放在生根培养基中于适宜条件下培养，约1~2周后即生根，以长成完整植株。
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优选1年生铁皮石斛植株上生长健壮的茎段
外植体的选择
接种小芽苗多易于在苗基部形成丛生芽。
苗的高度为1～2cm时,丛生芽增殖倍数最高数。
生长发育健壮苗优先
1
2
3
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外植体的处理
Text 1
Text 2
Text 3
摘去叶片和膜质叶鞘，剪成约2cm长带节的小段。
用洗洁剂清洗后置流水下冲20~30 min。
。
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接种实验
一、接种准备工作
1、超净工作台开紫外灯照射10-20min送风
2、外植体消毒（继代培养采用已建立的无菌培养物作为材料）
3、工具消毒
二、接种操作
1、用消毒工具、器皿，切取铁皮石斛幼茎段2cm
2、接种环烧红，沾一下培养基
3、镊取茎段插于培养基中
4、封口、标记
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