文档介绍：山东农业大学
硕士学位论文
中国部分地区草坪丝核菌的融合群鉴定及生防木霉菌株的筛选
姓名:张爱萍
申请学位级别:硕士
专业:植物病理学
指导教师:于金凤
2010-12-08
山东农业大学硕士学位论文
中文摘要
随着城市化进程的不断加快,草坪在城市绿化中的作用也越来越明
显。然而由于不当的水肥管理和修剪,草坪丝核菌病害的发生也越来越严
重。目前,在对病害的防治中,提倡综合防治,而生物防治,尤其是拮抗
木霉在土传病害防治中的作用尤为显著。本研究对山东省青岛、东营、泰
安、上海市、广东省广州等地的草坪丝核菌进行了系统研究并筛选出了对
优势融合群具有明显拮抗作用的生防木霉菌株。具体结果有如下几个方
面:
、东营、泰安、上海市、广东省广州等地采集草坪
丝核菌病害标本,采用常规组织分离法分离菌株获得 48 个丝核菌菌株。
融合群测定结果表明,这些菌株分别属于多核丝核菌的 WAG-Z、AG1-IA、
AG4-HG-I 融合群及双核丝核菌的 AG-A、AG-P、AG-L 融合群构成,其
中 WAG-Z 群出现频率最高,占全部菌株的 %,为优势融合群;其次
是 AG-A 群,占 %;再依次为 AG1-IA 群,占分离菌株的 %;
AG4-HG-I、AG-P 和 AG-L 群均有 1 个菌株,均占分离菌株的 %。另
外 AG-P 群、AG-L 群和 AG-A 群是国内外首次从草坪上分离得到的三个
融合群。
,其菌丝经 DAPI 染色后制成玻片,置于
荧光显微镜下观察,发现草坪丝核菌的细胞核相大致分两种:多核和双核,
其中 AG1-IA 融合群的菌株细胞核数目多为 5-11 个;AG4-HG-I 融合群的
菌株细胞核数目为 3-10 个;WAG-Z 融合群的菌株核相较为复杂,有单核
细胞、双核细胞及多核细胞,其中以多核为主;AG-P、AG-L 和 AG-A 融
合群的菌株均为双核。
- 1
中国部分地区草坪丝核菌的融合群鉴定及生防木霉菌株的筛选
-ITS 区序列分析法,对草坪丝核菌不同融合群菌株
进行了分子鉴定。结果表明,所有测试菌株其 rDNA 序列高度保守,
ITS1、ITS2 区存在不同程度的差异,隶属不同融合群或不同亚群的菌株
其 rDNA-ITS 区序列存在较大的差异,而相同融合群或亚群菌株的一
致性较高,利用此基因序列对丝核菌不同融合群或亚群的菌株可以进行有
效区分和鉴定。
,对 10 个初筛木霉菌株的生长速度、耐性、
产孢量、抗生作用等 8 个主要性状指标进行综合评价和分析。结果表明,
木霉菌株 T05-037 的灰色关联度 ri= 最大,其次是 T05-066 和 T05-048
菌株,其灰色关联度分别为 和 。表明 T05-037、 T05-066 、
T05-048 这三个木霉菌株的综合性状与构建的理想的参考菌株接近程度
大,是比较理想的拮抗丝核菌的木霉生防菌株。其中,T05-037 菌株的综
合评价结果最好。
– 037,利用形态分类学的方法
初步将其鉴定为绿色木霉(Trichoderma viride)。利用室内平板对峙方法
评价木霉菌株T05-037对隶属不同融合群丝核菌的抑制作用。结果表明,
T05-037木霉菌对供试的分属4个不同融合群的丝核菌菌株都有较强的抑
制作用(%-%),其中T05-037菌株对属于WAG-Z
融合群的丝核菌菌株抑制率最高,说明木霉菌株T05–037对草坪丝核菌病
害具有良好的生防潜力。
关键词:草坪丝核菌融合群 rDNA-ITS 拮抗木霉抑制率
2
山东农业大学硕士学位论文
Abstract
Turfgrasses are more and more impotant in the urban afforestation, and now the
disease of turfgrasses caused by Rhizoctonia spp is mon and important disease. In
this study, we indentified the anastomosis group obtained from turfgrass in Qingdao,
Taian, Dongying of Shandong Provinc