文档介绍：DNA的粗提取与鉴定
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目的要求
1、了解从细胞中提取DNA的基本原理
2、初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法
3、观察提取出来的DNA
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实验思路
1、DNA从哪提取？
2、怎样将DNA与细胞中的其他物质分离？
3、怎样鉴定我们提取的DNA？
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实验原理
一、DNA的溶解性
1. DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。 mol／L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。（图5-1）
，但是细胞中的某些蛋白质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
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实验原理
二、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
蛋白酶只能水解蛋白质
大多数蛋白质不能忍受60-80℃的高温，但DNA在80 ℃以上才会变性
洗涤剂可以瓦解细胞膜
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实验原理
三、DNA的鉴定
DNA遇二苯***（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯***可以作为鉴定DNA的试剂。
思考：还有哪些鉴定DNA的方法？
***绿（蓝绿色）
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二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计
（一）实验材料的选取
材料：新鲜的鸡血
注意：
本实验中，要往鸡血中加入抗凝剂（柠檬酸钠溶液）
原则上只要含DNA的生物材料都可以，但是选取DNA含量相对较高的生物组织，成功率更大。
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(1)先将新鲜的鸡血离心，获得鸡血细胞
(2)在鸡血细胞中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液
1、破碎细胞
讨论：为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？
利用了什么原理？
2、过滤，获取含DNA的滤液
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讨论：为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质
三、去除滤液中的杂质
高盐浓度→溶解DNA→除去在高盐溶液中不能溶解的杂质
低盐浓度→析出DNA → 除去溶解在低盐溶液中的杂质
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讨论：方案二与方案三的原理有什么不同？
答：方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开；
方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA分离
方案二利用了酶的专一性；方案三利用了DNA的稳定性。
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