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，鼬喇，结直肠癌蚱舳覥岛的去***化及其临床意义．论著．通信作者：郑民华，撼鷋哪．叶青冯波彭远飞李健文蔡劬陈雪华俞焙秦马君俊陆爱国王明亮刘炳亚郑民华【摘要】【关键词】结直肠肿瘤；畇；㊣毋珻籢眦目的探讨结直肠癌中畇基因的表达与启动子区杭谆奘沃的关系。以及畇基因去***化水平与结直肠癌临床病理特征的关系。方法采用半定量法检测例结直肠癌和相应癌旁组织中畇基因的表达及去***化试剂氮．蜒醢瓵．干预对结直肠癌细胞蚐的．虮达的影响。采用亚硫酸氢盐修饰测序ḿ觳．砬昂驝岛的***化情况。采用巢式***化笆凳庇ü舛縈法检测例结直肠癌组织和例相应癌旁组织中．畇基因的***化状态，并分析其与临床病理特征的关系。结果结直肠癌组织中的表达水平．，高于相应癌旁组织的．，差异有统计学意义．。瓹处理后，蚐细胞畇表达水平明显上升，同时畇基因启动子区旱募谆矫飨越档汀％的结直肠癌组织和．／南嘤Π┡宰橹．虮蝗ゼ谆嶂背Π┳橹，蛉***化的趋势明显强于相应癌旁组织．。基因的去***化水平与结直肠癌的淋巴结转移、临床病理分期及远处转移有关。结论结直肠癌中畇基因的上调表达与启动子区旱娜ゼ谆刺幸欢ü亓!．虻娜ゼ谆接型晌=嶂背Π┗颊判断预后的潜在标志物．***化；拥#’．脱氧胞苷鱳，，琇琑，琒鉙猦，簔．【】甅··．飀．產．．．—作者单位：上海交通大学医学院附属瑞金医院普通外科上海市微创外科临床医学中心上海市消化外科研究所，猣，，瑃猻瑆痚．甶畇猦，琇琙，：—．猻．．
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哪鲅罚嬖傺由表达很大程度上取决于启动子区旱募谆关系，并进一步研究畇的去***化水平与收集年轮率质鹾缶理检查证实的例结直肠癌及例距癌组织以远的相应癌旁组织标本，一。４妗Ｈ私嶂背科研究所传代保存．用含％腞公司苡贮存液，分装成每管后，一。炒妗＝嶂背直鸫ù嘌．騧募觳猓菏褂肨试剂拦鶬抽提细胞和组织总使用反转录试剂盒拦鶳公司“％琼脂糖剂盒拦鶳公司崛∠赴妥橹蜃止夤舛燃撇舛―吸光度值芭ǘ取℃变性．纯化回收修饰后的穕去离子橇蛩崆庋涡奘尾庑珺喝“橇蛩嵫涡奘魏驞作为模板，聚合酶鹿鶴进反应条件：℃预变性产物经溴化乙锭染色的デ碇悄国进行蓝白斑筛选。取白斑摇菌．每个样本挑个克隆．送上海博尚生物技术有限公籹是一种神经突触核蛋白，与仅．及畇有很高的同源性，共同组成神经突触核蛋白家族。畇主要定位于外周神经系统，但是在乳腺癌、卵巢癌等肿瘤中散失组织特异性而异常高表达．且在晚期肿瘤中表达升高更为明显āＴ谌橄侔┑幕蜃橹形捶⑾．的突变及扩增现象，畇在乳腺癌中的异常状态，因此，通过检测肿瘤组织中畇的去***化水平对乳腺癌及其他肿瘤患者病情转归的预测及预后的评估可能也具有潜在的指导意义【。本研究通过检测、／基因在结直肠癌组织中的表达．分析其与启动子区杭谆刺结直肠癌临床病理特征的关系。初步探讨蛉ゼ谆阶魑=嶂背Π┲琢霰志物的可能性．资料与方法一、标本与细胞癌细胞系、、由上海消化外培养液拦鶪公司嘌赴诤隙却％时消化收集细胞。二、实验方法．杂氮．蜒醢瓵斫嶂背Π┫赴航繧撼逡褐校涑蒷癌细胞、、常规消化，每瓶按螅直鹩煤瓹的培养液处理细胞．蟾恍碌暮同药物浓度的培养液，对照组常规培养。螅收集细胞提取总突蜃镈。分光光度计拦鶥公司舛≧浓度。醋B汲蒭芴逑穕。取絜选用行从ΑＲ镄蛄屑。反应条件如下：℃预变性姹湫嘶延伸凝胶电泳。溴化乙锭染色。凝胶图像分析系统拦鶤公司≒产物。瓺的提取和亚硫酸盐修饰：将细胞重