文档介绍:菌种的保藏与管理 菌种保藏的意义?菌种保存是为了减慢或停止菌种的生长繁殖﹔不被杂菌污染﹐在较长时期内保持著生活能力。以便为日常工作需求提供可靠的优质菌株。?微生物具有生命活力,在传代过程中容易发生变异甚至死亡,因此菌种保存是一项重要的基础工作,是微生物基础学工作的一项重要内容,也是药品微生物工作中的一项常用技术。?更有效的利用微生物资源。菌种保藏机构常用的菌种保藏方法方法主要原理适用的微生物保藏时间特点斜面琼脂低温保存低温( 4℃)广泛 1--6 个月简便液体石蜡保存低温、缺氧广泛 1年以上简便干燥(沙土)保存干燥、无营养产孢微生物 1--10 年简便但有效冷冻真空干燥保存干燥、低温、缺氧广泛 5--10 年以上复杂但有效液氮超低温保存超低温广泛数十年复杂但有效原理 、生化特性在人工创造的条件下尽量降低微生物细胞的代谢强度,使细胞处于基本休眠状态,生长繁殖受到抑制但又至于不死亡,以减低菌种的变异率。低温、干燥、缺乏营养等环境条件都有抑制微生物代谢的作用。 2. 低温、干燥、真空是用于菌种保藏的重要手段。 3. 在选择方法时,首先要考虑方法能否长期有效的保持菌种原有的特性, 同时也应兼顾到方法的经济和简便。菌种保藏步骤?挑选特征典型的纯菌菌落。?确定保藏的合适菌体形态。?选择最适宜的方法保存。?定期对菌种进行检查,看是否有变化,保藏期满及时进行移种。琼脂斜面低温保存法?方法:将经常使用的菌种的典型菌落接种在斜面上,按规定的时间和温度培养,待充分生长后,把培养好的新鲜菌种用牛皮纸包好。为减缓培养基的水分蒸发,延长保藏时间,将管口塞上橡胶塞。放在 4℃左右的冰箱中保存,每隔 2--3 个月移种一次,继续保存。?适用范围:细菌、酵母菌和霉菌保藏。?优点:简便、易于推广、对大多数微生物都适用。?缺点:保藏期太短、传代次数多、易发生变异和污染。注意事项?保藏的菌种应是新鲜培养物。?必须定期检查保藏菌种的冰箱的温度、湿度以及菌种管的橡胶塞是否松动,如有异常应及时处理。?每次移植后,应与原菌种的编号、名称逐一核对,确证无误后再保藏。?保藏细菌种用的培养基应无糖,其他菌类小于 2%为宜,以免产酸过多, 影响菌种生长。?铜绿假单胞菌在冰箱中易发生菌体自溶而死亡,不宜用本法保存。(可选择适宜的培养基置室温下保存) 液体石蜡保存法