文档介绍：病毒与其它微生物的区别敏感性微生物种类结构在无活细胞的培养基中生长二等分裂繁殖核酸类型核糖体抗生素干扰素细菌原核细胞型+ + DNA, RNA ++- 支原体原核细胞型+ + DNA, RNA ++- 立克次体原核细胞型- + DNA, RNA ++- 衣原体原核细胞型- + DNA, RNA ++- 螺旋体原核细胞型-(+) + DNA, RNA ++- 真菌真核细胞型+ 出芽、产生孢子 DNA, RNA + - - 病毒非细胞型- - DNA或 RNA - - +病毒致病过程四. 病毒与宿主相互关系的探索时期?病毒核酸可以整合到宿主细胞基因组中? DNA 是噬菌体的遗传物质?某些病毒感染引起细胞融合?某些病毒引起细胞生长****性和形态特征的转化??转录增强子元件、转录因子与启动子结合转录增强子元件、转录因子与启动子结合 ---SV40 ---SV40 的研究的研究??RNA RNA 聚合酶聚合酶ⅢⅢ与启动子识别并进行转录与启动子识别并进行转录-- --腺病毒腺病毒 VA VA基因的研究基因的研究??基因在基因在 DNA DNA 基因组上的位置是不连续的,有内含子存在, 基因组上的位置是不连续的,有内含子存在, 转录体需要剪裁,拼接成转录体需要剪裁,拼接成 mRNA mRNA ---T4 ---T4 噬菌体和腺病毒的研究噬菌体和腺病毒的研究??mRNA3 mRNA3 ’’- -端的聚腺苷酸化端的聚腺苷酸化----- ----- 痘病毒痘病毒??首次发现聚腺苷酸化信号首次发现聚腺苷酸化信号-----SV40 -----SV40 ??mRNA5 mRNA5 ’’- -端的帽子结构和碱基的***化作用端的帽子结构和碱基的***化作用----- ----- 呼肠病毒呼肠病毒??翻译后的前体经蛋白酶加工裂解成为功能蛋白质,经高尔翻译后的前体经蛋白酶加工裂解成为功能蛋白质,经高尔基体的糖基化以及被蛋白激酶磷酸化的研究基体的糖基化以及被蛋白激酶磷酸化的研究------ ------ 病毒病毒意义: 意义: 1. 1. 揭示了病毒正链揭示了病毒正链 RNA RNA 基因组复制和基因表达的一种新类型。基因组复制和基因表达的一种新类型。 2. 2. 对对20 20世纪世纪 60 60年代所形成的中心法则理论的重要修饰和补充。年代所形成的中心法则理论的重要修饰和补充。 3. 3. 反转录酶广泛应用于反转录酶广泛应用于 cDNA cDNA 克隆的技术。克隆的技术。(一) 反转录酶的发现 20 世纪 70 年代反转录酶的发现----RNA 肿瘤病毒?? 20 20 世纪世纪 70 70年代另一个病毒学研年代另一个病毒学研究中最有深远影响的发现。究中最有深远影响的发现。??在对噬菌体与其寄主相互关系在对噬菌体与其寄主相互关系的研究中发现的。的研究中发现的。(二)限制性内切酶的发现??1972 1972 年年 P. Berg P. Berg 在斯坦福大学第一次体外构在斯坦福大学第一次体外构建重组建重组 DNA DNA 分子,即将分子,即将λλ噬菌体基因和噬菌体基因和 半半乳糖基因插入乳糖基因插入 SV40 SV40 的环状的环状 DNA DNA 中。中。??1973 1973 年年 和和S. Cohen S. Cohen 质粒质粒 pSCIOI(Tet pSCIOI(Tet r r) )上仅有一个上仅有一个 EcoR EcoR ⅠⅠ切点的特点与另切点的特点与另一个质粒一个质粒 R R 6-3 6-3(Neo (Neo r r) )组合成嵌合质粒,转化组合成嵌合质粒,转化 后在含四环素和新霉素培养基上选出有后在含四环素和新霉素培养基上选出有 Tet Tet r r和和Neo Neo r r的新转化子。的新转化子。 Paul Berg(1926-) (三)基因工程的诞生 CMV 立刻早期基因 IE的启动子含有增强子、 TATAbox 、和转录起始位点载体的一些必要元件如复制原点、启动子、转录增强子、翻译增强子等等大多来自病毒多种病毒载体的广泛应用。 SV40 的 poly A 病毒的定义体积小,结构简单,只有一种类型的核酸,只能在活的、敏感细胞内以复制方式增殖的非细胞型微生物。