紫外可见分光光度计原理使用及维护.ppt

文档介绍：紫外可见分光光度计原理使用及维护
黔西煤化工分析化验中心
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一、吸收光光度法概述
吸收光度法
紫外可见分光光度法
200—780nm
红外光谱法
—1000um
紫外可见分光光度法
200—400nm
可见分光光度法
400—780nm
1、吸收光度法概念：基于物质对光的选择性吸收而建立的分析方法称为吸收光度法。
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2、吸收光谱的分类
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3、吸收光度法的理论基础和适用范围
1）吸收光度法的理论基础：
朗伯比尔定律：A=kbc，
朗伯定律是说明光的吸光度与吸收层厚度成正比；比尔定律说明光的吸光度与溶液浓度成正比。
2）朗伯比尔定律适用范围：朗伯定律对于各种有色溶液都适用，比尔定律只有在一定浓度范围内使用，吸光度A和浓度才成直线关系，。
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二、分光光度计的特点及结构
1、特点：
a、与其它光谱分析方法相比，其仪器设备和操作都比较简单，费用少，分析速度快；
b、灵敏度高；
c、选择性好，有最大吸收波长。
d、精密度和准确度较高;
e、用途广泛。
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2、结构
1）光源（氘灯、钨灯）→2）单色器
（光栅）→3）吸收池→4）检测器→
↑样品
5）信号显示系统
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三、分光光度法测定时需要考虑的因素
1、反应条件的选择
1)显色剂的用量；
2)溶液酸度；
3)溶液温度；
4)显色时间；
5)溶剂，比如有机溶剂常能降低有色化合物的分离度，从而提高显色反应的灵敏度。
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2、显色反应时应注意共存离子的干扰
消除办法：
1)、控制溶液酸度；
2)、加入掩蔽剂；
3)、选择适当的参比溶液；
4)、选择适当的波长；
5)、利用氧化还原反应；
6)、采用适当的分离方法；
7)、利用导数光谱法、双波长等新技术。
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3、参比溶液的选择
用参比溶液调节分光光度计的吸光度为0，然后测定试样溶液或者标准溶液的吸光度值，参比溶液的作用除了消除吸收池壁对入射光的放射和散射等影响外，合理选用时还可以消除其他干扰，使测得的吸光度正确反映被测物的浓度，提高测定的准确性。