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丝氨酸羟甲基转移酶的电泳制备.ppt

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丝氨酸羟甲基转移酶的电泳制备.ppt

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文档介绍

文档介绍:丝氨酸羟***转移酶的电泳制备
项 目 三
丝氨酸羟***转移酶的电泳制备
第 1 组
第 2 组
第 3 组
第 4 组
第 5 组
第 6 组
第 7 组
第 8 组
一、汇报交流方案
二、讨论确定方案
SDS-PAGE制备SHMT
SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳(SDS-PAGE)是一种在聚丙烯酰***凝胶电泳体系中加入SDS和巯基乙醇,以消除蛋白质分子所带的净电荷和形状对电泳迁移率影响的电泳技术。
SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳体系中待检蛋白质的迁移率主要依赖于其相对分子质量,因此被广泛用于测定蛋白质的相对分子质量。
十二烷基硫酸钠是一种阴离子去污剂,与蛋白质结合可形成蛋白质-SDS复合物,由于十二烷基硫酸根带负电,使各种蛋白质-SDS复合物都带上相同密度的负电荷,它的量大大超过了蛋白质分子原来的电荷量,因而掩盖了不同种蛋白质间原有的电荷差别。
在聚丙烯酰***凝胶电泳体系中加入SDS和巯基乙醇,能掩盖不同蛋白质间的电荷差异,并引起蛋白质构象变化,从而导致变性后的蛋白质分子在凝胶电泳中的迁移率取决于其相对分子质量大小,而与其他因素(原有电荷、形状)无关。通过这种电泳方式可将细胞中所有蛋白质根据各自的相对分子质量大小而分离开来。
电泳方向
混合样品
电泳
带孔胶
大分子
小分子
SHMT的电泳制备操作流程
安装电泳槽
剥胶
电泳
上样
制胶
染色
三、关键操作
试剂配制
制胶
剥胶
四、方案实施
清洁
领取物料
操作
填写生产记录
清场与清洁