文档介绍：《生物工程大实验》基因工程
生物工程大实验项目一览表
序
实验名称 实验项目名称 实验类型 实验要求 学时 每组人数
号
淀粉酶产生菌的筛选及菌株鉴定 综合性 必做 8 3
酶工程实验 淀粉酶的提取 设计性 必做 4 3
1
淀粉酶固定化及其性质测定 综合性 必做 6 3
PCR 技术扩增产淀粉酶的细菌
基因工程 设计性 必做 6 3
16SrDNA
2 实验
DNA 重组与转化 综合性 必做 6 3
外源基因在大肠杆菌细胞中的表达 综合性 必做 6 3
微生物生长曲线的测定 设计性 必做 3 3
发酵工程实
淀粉酶产生菌发酵条件的优化 设计性 选做 8 3
3 验
果酒酵母的流加培养与分批培养 综合性 选做 8 3
果酒的酿造 综合性 必做 7 3
《生物工程大实验》基因工程教案
实验一 PCR技术扩增产淀粉酶的细菌 16SrDNA序列
一、 实验目的和内容
目的 . 学****PCR 扩增 细菌 16SrDNA序列方法
掌握 PCR基本操作技术，以及琼脂糖凝胶电泳技术
内容： 1）细菌基因组 DNA的提取
2 ） 16S rDNA 序列 pcr 扩增
3 ）琼脂糖凝胶电泳
二、实验原理
1985年美国 Cetus 公司的 Kary Mullis 等人设计并研究成功的一种体外核酸
扩增技术 (polymerase chain reaction PCR), 这是一种类似于 DNA的天然复制
过程，以待增的 DNA为模板，在体外由
引物介导的酶促合成特异 DN***段的方
法。将目的基因 DNA在高温（ 94℃）下
解链成为单链模板 ; 人工合成的一对与
目的基因两侧序列相互补的寡聚核苷酸
引物在低温 （30-60℃）下分别与变性的
目的的基因片段两侧的两条链的部分序
列互补结合；在中等温度（ 65-75℃）下
由耐热 DNA聚合酶（ Taq 酶）将 dNTP中
的脱氧单核苷酸加到引物 3’-OH末端，
并以此为起点，沿着模板