文档介绍：光谱分析四荧光分析法
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第一章 光谱分析 第二节 荧光分析法
一、概述
1、荧光光度分析法
由激发态能级回到基态能级的过程中以光的形式放出多余的能量，并发射出比原波长更长的光谱，这一过程称分子发光，检测分子发射光谱的分析方法称为荧光光度分析法。
第一章 光谱分析 第二节 荧光分析法
一、概述
2、荧光分析特点
专一性强
灵敏度高
选择性强
发光发式多
可分析参数多
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第一章 光谱分析 第二节 荧光分析法
二 、分子发光的理论
较高电子激发态振动能级
以热和无辐射的形式释放能量
最低第一级电子激发态振动能级
以光子的形式释放能量
基态分子
能量吸收过程
λ
磷光
荧光
发射荧光和磷光的示意图
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常见的光致发光现象是荧光和磷光
荧光和磷光的主要区别: 
①荧光: 激发光停止照射后，发光过程持续 10-9-10-6s
磷光: 发光过程持续10-4-10s
②荧光是从最低单线激发态发出，磷光则由最低三重态能级发出。
二、分子发光的理论
第一章 光谱分析 第二节 荧光分析法
耗能方式
①在同一能级中分子间的相互碰撞消耗能量；
②无辐射衰减转给周围分子变成振动消耗；
③辐射荧光——以光子的形式释放能量；
④光分解消耗分子内部的能量。
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分子荧光的类型
物理发光 指荧光分子吸收了光能而产生的荧光，称为物理发光。也称光致荧光。
化学发光 是指分子与分子之间的化学反应所产生的化学能，在化学反应过程中释放能量而发射荧光。也称化学荧光。
生物发光 通过生物体内的荧光酶与荧光物质相互作用，在生物化学反应过程中所释放出来的光能。也称生物荧光。
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激发光谱: 固定测量波长为荧光（或磷光）最大发射波长，然后改变激发波长，以激发光波长为横座标，荧光强度为纵座标作图，即可绘制。
发射光谱: 固定激发光波长为其最大激发波长，然后测定不同的波长时所发射的荧光或磷光强度，将荧光的光波长为横座标，荧光强度为纵座标作图便可得到荧光光谱
第一章 光谱分析 第二节 荧光分析法
发射光源
激发光源
激发光谱波长
发射光谱波长
荧光分子
激发光源
激发光谱波长
发射光谱波长
荧光分子
发射光源
(改变波长)
选择最大发射波长
固定波长
(改变波长)
激发光谱测试示意图
发射光谱测试示意图
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