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针刺调控NF-κB通路抑制视网膜小胶质细胞活性效应及机制研究.pdf

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针刺调控NF-κB通路抑制视网膜小胶质细胞活性效应及机制研究.pdf

上传人:陈潇睡不醒 2021/9/15 文件大小:2.58 MB

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文档介绍

文档介绍:成都中医药大学
(眼科学院)
二 0 一八届硕士研究生学位论文
针刺调控 NF-κB 通路抑制视网膜小胶质细胞活性效应及机制研

Acupuncture regulates NF-κB pathway inhibits retinal microglia
activity and mechanisms
研究生姓名:李杰
指导教师 :叶河江 研究员
学科专业 :中医五官科学
二○一八年五月
学 位 论 文
针刺调控 NF-κB 通路抑制视网膜小胶质细胞活性效应
及机制研究
Acupuncture regulates NF-κB pathway inhibits retinal microglia activity
and mechanisms
李杰
指导教师姓名: 叶河江 研究员
申请学位级别: 硕士学位 专 业 名 称:中医五官科学
论文提交时间: 2018 年 4 月 论文答辩时间:2018 年 5 月
二○一八年五月
成都中医药大学 2018 届硕士学位论文
中文摘要
目的:感光细胞凋亡是视网膜退行性疾病的关键致病基础,视网膜小胶质细胞活
化是促感光细胞凋亡的重要机制。通过建立 MNU 诱导的大鼠视网膜感光细胞凋
亡模型,探讨针刺抑制视网膜小胶质细胞活性阻断感光细胞凋亡进程的确切效
应,及其调控 NF-κB 信号通路抑制视网膜小胶质细胞活化的关键机制,以探索
针刺防治视网膜退行性疾病的作用靶点。
方法:通过向大鼠腹腔注射 MNU 建立视网膜感光细胞凋亡模型,将其分为:正
常组,模型组,维 A 组,针刺组,连续治疗 14 天。采用 HE 染色观察视网膜组
织形态及视网膜 0NL 厚度变化;TUNEL 法检测视网膜感光细胞凋亡情况;免疫
荧光法检测视网膜小胶质细胞 OX-42 在视网膜中的表达; ELISA 法测定视网膜
IL-1β、TNF-α含量;Western blot 法检测视网膜 NF-κB P65、IκBα蛋白表达。
结果:
HE 染色观察发现感光细胞内外、节水肿,排列疏松、紊乱,细胞
核肿胀,视网膜 0NL 厚度变薄;Tunel 法染色示造模后光感受器层细胞凋亡数量
增加,并在第 3d 达高峰,提示感光细胞发生凋亡;免疫荧光检测示造模后 1d
视网膜 ONL 开始出现视网膜小胶质细胞 OX-42(+),随时间推移逐渐增多,
于第 5d 达高峰,7d 逐渐减少,从时间一数量曲线可见感光细胞凋亡高峰早于视
网膜小胶质细胞 OX42(+)的迁移高峰。
2. ①HE 染色示:与正常组比较,各组视网膜 ONL 厚度变薄、感光细胞结构紊
乱;与模型组比较,维 A 组和针刺组视网膜 ONL 厚度增加,并保留一定数量的
感光细胞。
②Tunel 法染色示:与正常组相比,各组平均光密度增加(P<),提示感
光细胞发生凋亡;与模型组比较,经维 A 和针刺干预后平均光密度降低,差异
具有统计学意义(P<-);针刺组平均光密度低于维 A 组(P<),
提示针刺减少感光细胞的效果优于维生素 A。
③视网膜小胶质细胞 OX-42 检测示:与