文档介绍：酶联免疫吸附试验检测的影响因素分析
钱瑞 (山丹县人民医院 734100)
【摘要】目的 通过对酶联免疫吸附试验检测的影响因素分析，探讨各因素 对结果的影响，以便寻找解决的方法和加强质量控制，从而保证检测结果的准确 性和精确性。
【关键词】酶联免疫吸附试验影响因素分析
【中图分类号】 【文献标识码】A
【文章编号】1672-5085 (2013)41-0059-02
酶联免疫吸附试验(ELISA)是将抗原抗体免疫反应的特异性和酶的高效催化 作用原理有机地结合起来，可敏感地检测生物标本中微量的特异性抗体或抗原的 临床检验方法，而且其反应中各组分的成本较为底廉,特别是对肝炎病毒的检测, 最基层的医院也能开展。因其操作简单，灵敏度高，特异性好，经济安全，不需 要特殊设备等特点而在临床上广泛应用。为辅助临床诊断与生物科研起到了积极 的推动作用。在从事检验工作多年中深知ELISA测定中影响因素较多，由于其操 作步骤复杂，操作过程中每个环节都会对试验结果产生影响，甚至出现错误的结 果，因此，必须加强ELISA检测的全面质量控制，保证其结果的准确可靠。现将 影响因素做以分析。
1材料
目各种ELISA试验均有商品化的专用试剂盒。应选择质量优良、有批准文号 且在有效期内的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作。从冰箱中取出的试剂 应放在室温下或37°C平衡30分钟再进行测试。保存试剂盒的冰箱应经常检查储 存温度并做好记录，冰箱应避免频繁开关，试剂使用前应摇匀。
酶联免疫吸附实验中标本的质量也是影响结果的关键因素之一，标本的干扰 物质容易引起假阳性或假阴性的结果。
，接受标本应将标本上的标签与申请单逐一 核对，验收签字。对科室自采的标本，接到申请单后，按申请单上的姓名将受检 者喊应，确定性别、年龄、，然后编号抽血，避免标本采集错误。
，应尽量避免溶血，对于重度溶血标本应重新采血进行测定。 因标本溶血红细胞破坏溶解时释放出大量血红蛋白，血红蛋白中的亚铁血红素具 有过氧化物酶活性的物质，在以HRP为标记的ELISA试验测定中，可能会增加非 特异性显色而出现假阳性结果，对于严重脂血，黄疸及药物治疗等影响检测结果 的标本，应叮嘱受检者适时重新检测。
。通常血清标本可在2~8°C保存，如样 品在7天内不测定，需将血清或血浆和血细胞分离后，置一20°C保存。冷冻保存 标本避免反复冻融，标本的反复冻融会因其所产生的机械剪切力对标本中的蛋白 等分子产生破坏作用，是抗体效价下降从而引起假阴性结果。
，彻底去除纤维蛋白，否则可因残留的纤维蛋白 原非特异吸附于微孔而造成假阳性结果。
，可能造成免疫检测标本的污染。其 原因是免疫指标是定性检测，标本在检测生化试验时极微量的交叉污染都可能造 成免疫测定结果的不准确。此外，全自动酶免疫分析仪的加样针或加样吸头清洗 力度不够，造成阳性标本和其他标本的污染。
2方法
加样应严格按照试剂盒说明书中所规定的量和顺序进行，加样时应将标本加 在微孔反应板底部，避免加在孔壁上部，注意不可溅出，不能产生气泡，如不