文档介绍：细胞因子和细胞粘附因子测定
第一节 生物学测定方法
一、促进细胞增殖和抑制细胞增殖测定法
二、细胞毒活性测定法
三、抗病毒活性测定法
四、趋化活性测定法
五、生物学活性测定方法学评价
第二节 免疫测定方法
一、ELISA方法
二、流式细胞分析法
三、酶联免疫斑点试验
四、免疫学测定方法学评价
细胞因子和细胞粘附因子测定
第三节 细胞因子与细胞粘附分子测定的临床应用
一、临床应用原则
二、特定疾病诊断的辅助指标
三、评估机体的免疫状态、判断治疗效果及预后
思考题
小结
细胞因子和细胞粘附因子测定
是由活化的免疫细胞及某些基质细胞表达并分泌的活性物质，其主要生物学功能是介导和调节免疫应答及炎症反应，其化学本质是蛋白质或多肽。
细胞因子
细胞粘附因子
是介导细胞间及细胞与细胞外基质间粘附作用的分子，其化学本质为糖蛋白，可以细胞膜表面表达和可溶性两种形式存在。
细胞因子和细胞粘附因子测定
第一节 生物学测定方法
细胞因子和细胞粘附因子测定
：
DNA扩增法
RNA印迹法
原位杂交法
核酸酶保护分析
生物学测定法分类
细胞因子和细胞粘附因子测定
根据细胞因子特定的生物学活性,应用相应的指示系统,同时与标准品对比测定,从而得知样品中细胞因子的活性水平,一般以活性单位(U/ml)表示
生物活性测定法原理
有 助 于 细 胞 因 子 检 测
的 活 性 作 用 包 括
有助于细胞因子检测的活性作用
刺激细胞增殖或集落形成的活性维持细胞生长和存活的特性
抑制细胞生长或破坏细胞的效应促进细胞趋化或抗病毒作用
细胞因子和细胞粘附因子测定
以细胞因子依赖性细胞株为靶向，通过观察特定的细胞因子刺激或抑制依赖性细胞株增殖来评估细胞因子的活性水平。
一、促进细胞增殖和增殖抑制测定法
细胞因子和细胞粘附因子测定
直接计数法
简便、直观,但费时、主观因素影响大、难以标准化和自动化
细胞代谢活性测定方法
3H-TdR、125I-UdR掺入法或MTT等比色法
细胞代谢产物测定法
代谢产物荧光强度测定法和指示细胞表面标记或可溶性分子测定法
细胞增殖检测方法分类
细胞因子和细胞粘附因子测定
通过检测细胞DNA合成的增加或减少来判断细胞增殖的方法。在细胞的增殖过程中，DNA合成的增加使得指示细胞对核苷或碱基的需求增多，若将核苷标记上可以示踪的同位素（3H/125I ），通过检测细胞内的同位素含量，则可反映细胞增殖的程度。
结果客观易于自动化；适用于大标本量的测定
优点
缺点
方法的特异性受依赖细胞株影响；放射性污染
(1) 放射性核素掺入法
细胞因子和细胞粘附因子测定