印迹杂交技术.ppt

文档介绍：1第八章印迹杂交技术 2第一节核酸分子杂交的基本原理?基本概念:核酸分子杂交: ,可以形成异源双链核酸分子的过程。杂交体: 杂交形成异源双链核酸分子 3退火核酸分子杂交不同来源的核酸经变性和复性的过程,其中一些局部碱基互补片段在复性时形成杂化双链,此过程称分子杂交。加热 4 核酸分子杂交技术: 单链的核酸分子在合适的温度和离子强度下,通过碱基互补形成双链杂交体的一类技术。 5 ????????????核酸杂交技术: 分子探针:带有某种标记物的分子如核苷酸链片段退火加热 6 ?核酸分子杂交的基本原理 DNA 变性:融解温度(Tm 值):50 % DNA 变性的温度 DNA 复性:核酸杂交: 7 DNA 加热 50%DNA 发生变性此时的温度——融解温度( Tm ) 8 DNA 的变性与复性 9退火核酸分子杂交不同来源的核酸经变性和复性的过程,其中一些局部碱基互补片段在复性时形成杂化双链,此过程称分子杂交。加热 10第二节探针与标记?一、探针的基本条件①带有标记物,便于分析杂交体②为单链核酸,双链核酸探针使用前需变性解链③具有高度特异性,只与待测核酸杂交④探针序列通常是基因编码序列,因为非编码序列特异性低⑤探针标记灵敏度高而稳定,标记方法简便而安全