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细菌分离培养接种技术及生化.ppt

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细菌分离培养接种技术及生化.ppt

上传人:文库新人 2021/9/23 文件大小:7.18 MB

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文档介绍

文档介绍:细菌分离培养接种技术及生化
一、培养基的种类和选择 (一)基本条件



(二)培养基
培养基(culture medium)是由人工方法配制而成的,专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品。
用途:
①可用于细菌的分离纯化、传代和菌种保存
②可用于研究细菌的生理生化特性
③是对病原菌分离鉴定的主要环节和必不可少的手段

⑴营养物质:水、蛋白胨、肉浸液、牛肉膏、糖醇类、血液、无机盐、鸡蛋和动物血清、生长因子(Vit、aa、嘌呤、嘧啶等)。
⑵凝固物质:
最常用的为琼脂(agar),它是从石花菜中提出来的一种半乳糖胶,100℃溶解,40℃凝固,可利用琼脂来改变培养基的物理性状(固体或半固体),它是理想的固体培养基的赋形剂,其本身不被细菌分解利用,也无营养作用。
⑶抑菌剂和指示剂:
不是细菌生长繁殖的必需物质,是制备细菌的选择、鉴别培养基和判断结果的需要。
常用的抑菌剂有:胆盐、煌绿、亚硫酸钠、亚硒酸钠及一些染料和某些抗生素等。
常用的指示剂有:酚红、中性红、***红、溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝、中国兰等酸碱指示剂,美兰为常用的氧化还原指示剂。

液体培养基:牛肉汤 (牛肉浸液+1%蛋白胨
+%NaCl )
半固体培养基:~% agar
固体培养基: 营养物+ 2% agar
按物理性状
基础培养基:是其他培养基的基础,如普通肉汤、
普通琼脂平板、斜面、高层
营养培养基:BAP、罗-琴培养基、吕氏血清斜面
选择培养基:SS平板、BS平板、Mac平板等
鉴别培养基:糖发酵管、MIU、KIA、TSI等
特殊培养基:厌氧培养基、高渗培养基等
按用途

⑴肉膏汤的制备:
%牛肉浸膏 + 1%蛋白胨 + %NaCl加热溶解,调pH ~,分装,121℃,20分钟高压灭菌冷后待用。可用于标本和细菌的增菌。
⑵普通琼脂平板、斜面、高层:
肉膏汤 + 2%agar,加热溶解, 121℃,20分钟高压灭菌冷至50℃
平皿→ 普通琼脂平板:分离纯培养和药敏
倾倒 试管(斜放)→普通琼脂斜面:增菌、保存细菌
试管(直立)→普通琼脂高层:备用
⑶血琼脂平板:
普通琼脂平板营养物质灭菌冷至50℃ + 5%~10%脱纤维SRbc或RRbc,摇匀,倾倒无菌平皿,冷凝后即成血平板。
常用于营养要求较高的细菌的分离纯培养和药敏。
⑷半固体肉汤:
牛肉汤(牛肉浸膏汤)+ %~%agar→加热溶化 →分装→高压灭菌→冷却即成。
常用于保存菌种和观察细菌的动力。