文档介绍:实验四布鲁氏菌病检疫
(一)实验目的
初步掌握布鲁氏菌病试管凝集试验的免疫生物学检疫方法。
(二)实验原理
应用血清学方法检出血清中有抗体存在,则说明被检动物为布氏杆菌病患畜。动物感染布氏杆菌以后首先出现的是凝集抗体,再过一段时间才出现补体结合抗体,最后产生变态反应性。补体结合反应是一种高度特异性的,其阳性反应与感染的符合率,比血清凝集试验与感染的符合率高。我国的家畜布氏杆菌病检疫应用的免疫生物学方法主要是凝集试验。试管凝集反应:本试验按《家畜布氏杆菌病试管凝集反应技术操作规程及判定标准》进行。
(三)实验准备
抗原:由兽医生物药品厂生产供应。%石炭酸生理盐水作1:20稀释,长霉或出现凝集块的抗原不能应用。
被检血清:必须新鲜,无明显蛋白凝固,无溶血现象和腐败气味。
阳性血清和阴性血清:由兽医生物药品厂生产供应。
稀释液:%石炭酸生理盐水,用化学纯石炭酸与氯化钠配制,经高压灭菌后备用。
用具:1ml滴管、10ml滴管、试管架、洗耳球、10ml玻璃试管、移液器。
(四)实验步骤
(一)布病试管凝集反应
1、牛血清稀释和加抗原的方法
试管号(牛编号)
1
2
3
4
5
血清最后稀释度
1:25
1:50
1:100
1:200
1:400
%石灰酸生理盐水(ml)
0
被检血清(ml)
诊断抗原1:20
0
悬空加样
判       定
2、比浊管配制方法
试管号
抗原稀释(ml) 1:40
%石灰酸生理盐水(ml)
清亮度%
判断(标记)
1
0
100
++++
2
75
+++
3
50
++
4