文档介绍:会计学
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SrDNA基因的PCR扩增
第一页,编辑于星期日:三点 一分。
PCR技术简史
DNA的复制
核酸体外扩增的设想
聚合酶链反应的发明
ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC
5’
3’
TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG
3’
5’
解旋酶
解链酶
DNA
解旋解链
合成引物
子链延长
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第二页,编辑于星期日:三点 一分。
PCR技术简史
DNA的复制
核酸体外扩增的设想
聚合酶链反应的发明
ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC
5’
3’
TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG
3’
5’
DNA
解旋解链
合成引物
子链延长
GGAUCG
5‘
AUCGCG
5‘
引物酶
引物酶
RNA引物
RNA引物
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第三页,编辑于星期日:三点 一分。
PCR技术简史
DNA的复制
核酸体外扩增的设想
聚合酶链反应的发明
ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC
5’
3’
TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG
3’
5’
DNA
解旋解链
合成引物
子链延长
GGAUCG
5‘
AUCGCG
5‘
TAGCGCTATCGCATCGACGCT
3’
ATAGCGTAGCTGCGAGGATCG
3’
DNA
聚合酶
DNA
聚合酶
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第四页,编辑于星期日:三点 一分。
PCR技术简史
DNA的复制
核酸体外扩增的设想
聚合酶链反应的发明
1971年,Khorana提出:经过DNA变性,与合适引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可克隆tRNA基因。
但由于测序和引物合成的困难,以及70年代基因工程技术的发明使克隆基因成为可能,所以,Khorana的设想被人们遗忘了……
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第五页,编辑于星期日:三点 一分。
PCR技术简史
DNA的复制
核酸体外扩增的设想
聚合酶链反应的发明
1985年,美国PE-Cetus公司的Mullis等人发明了聚合酶链反应(PCR)
基本原理是在试管中模拟细胞内的DNA复制
最初采用E-coli DNA聚合酶进行PCR,由于该酶不耐热,使这一过程耗时,费力,且易出错
耐热DNA聚合酶的应用使得PCR能高效率的进行,随后PE-Cetus公司推出了第一台PCR自动化热循环仪
1993年,Mullis等因此项技术获诺贝尔化学奖
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第六页,编辑于星期日:三点 一分。
Kary B. Mullis
<<The Unusual Origin
of the Polymerase Chain Reaction>>
1989年美国《Science》杂志列PCR 为十余项重大科学发明之首,比喻1989年为PCR爆炸年,Mullis荣获1993年度诺贝尔化学奖。
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第七页,编辑于星期日:三点 一分。
生物样品
DN***段
基因诊断
基因治疗
基因工程产品
法医学检测
人类学研究
……
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第八页,编辑于星期日:三点 一分。
基因组DNA
获取特定DN***段
扩增特定DN***段
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第九页,编辑于星期日:三点 一分。
94℃变性
50-65℃退火
XX℃延伸
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