文档介绍:基因工程基本操作技术
第一页,共79页
第一节 离心技术
离心技术基本原理
离心机主要构造和类型
离心技术应用
第二页,共79页
生物样品悬浮液在高速旋转下,由于巨大的离心力作用,使悬浮的微小颗粒(细胞器、生物大分子的沉淀等)以一定的速度沉降,从而与溶液得以分离。
沉降速度取决于颗粒的质量、大小和密度。
离心技术主要用于各种生物样品的分离和制备。
离心技术在生物科学,特别是在生物化学和分子生物学研究领域,己得到十分广泛的应用,每个生物化学和分子生物学实验室都要配置各种类型的离心机。
第三页,共79页
一、基本原理
当一个粒子(生物大分子或细胞器)在高速旋转下受到离心力作用时,此离心力“F”由下式定义,即:
a----粒子旋转的加速度
m----沉降粒子的有效质量
ω---粒子旋转的角速度
r----粒子的旋转半径(cm)
第四页,共79页
∴ RCF = ×10-5×(rpm)2r
rpm---revolutions per minute为每分钟转数, r/min
低速离心时常以转速“rpm”来表示
高速离心时则以“g”表示
第五页,共79页
将离心机转数换算为相对离心力时,
首先,在r标尺上取已知的半径和在N标尺上取已知的离心机转数。
然后,将这两点间划一条直线,在图中间RCF标尺上的交叉点极为相应的相对离心力数值。
注意,若已知的转数值处于N标尺的右边,则应读取RCF标尺右边的数值;同样,转数值处于N标尺的左边,则读取RCF标尺左边的数值.
第六页,共79页
二、离心机的主要构造和类型
实验用离心机
制备性离心机
分析性离心机
工业用离心机
离心机
第七页,共79页
1、制备性离心机可分为三类
离心机一般有离心主机,转头和离心管三部分组成。
(1)普通离心机:最大转速6000rpm左右
(2)高速冷冻离心机:最大转速为20000~25000rpm(r/min)
(3)超速离心机:转速可达50000~80000rpm,装有真空系统,这是它与高速离心机的主要区别。
第八页,共79页
第九页,共79页
分析性离心机
分析性离心机使用了特殊设计的转头和光学检测系统,以便连续地监测物质在一个离心场中的沉降过程,从而确定其物理性质。
第十页,共79页