基因工程的基本操作程序白齐.ppt

文档介绍：基因工程的基本操作程序白齐
第一页，共52页
基因工程的基本操作程序
1、目的基因的获取
2、基因表达载体的构建
3、将目的基因导入受体细胞
4、目的基因的检测与鉴定
第二页，共52页
1. 目的基因主要是指：　_______________________
编码蛋白质的结构基因
2. 获取目的基因的常用方法
（1）从基因文库中获取
（2）利用PCR技术扩增
（3）人工合成
一、获取目的基因
第三页，共52页
①概念：
将含有某种生物不同基因的许多DN***段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库
（1）从基因文库中获取目的基因
提取某种生物的全部DNA
一定大小的许多DN***段
重组DNA分子(携带目的基因)
限制酶
与载体连接
受体细胞(基因文库)
筛选出产生特定性状的受体细胞
导入
外源DNA扩增
目的基因
分离
第四页，共52页
②种类
:
（如cDNA文库）
基因文库中包含了一种生物的所有基因,这种基因文库叫做基因组文库
基因文库中包含了一种生物的一部分基因,这种基因文库叫做部分基因文库.
优点：
操作简单
缺点：
工作量大，盲目性强
③从基因文库中获取目的基因
第五页，共52页
基因组文库与部分基因文库的关系
第六页，共52页
？为什么要构建基因文库？直接从含有目的基因的生物体内提取可以吗？
如果所需要的目的基因的序列完全不知，或只知道目的基因序列的一段等情况，往往就需要构建基因文库。
如果所需要的目的基因序列已知，可以通过PCR等方式获得，则不需要构建基因文库。
寻根问底
第七页，共52页
巩固训练
1、构建基因组DNA文库时，首先应分离细胞的（ ）
  
  
2、目的基因可从基因文库中获得，下列有关基因文库的描述正确的是（ ）

***段，导入某个生物体内，则这个生物就是一个基因文库


A
C
第八页，共52页
（2）利用PCR技术扩增目的基因
——多聚酶链式反应
是一项生物体外复制特定DN***段的核酸合成技术。通过此技术，可以在短时间内大量扩增目的基因。
：
DNA复制
要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物
：
第九页，共52页
四种脱氧核苷酸
一对引物：
耐热的DNA聚合酶(Taq酶）
模板DNA( 需含有目的基因 )
：
与目的基因的起始段互补。
：以_____方式扩增，即____（n为扩增循环的次数）
：
指数
2n
使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增
第十页，共52页