文档介绍:急性肾功能不全
***化***与家兔急性肾功能不全
【摘要】目的 学****用***化***复制急性肾功能不全的动物模型;观察急性肾功能不全时蛋白尿、血肌酐、肾酚红排泄率的变化,并根据实验结果分析和讨论致病因素及导致急性肾功能不全的可能发病机制。方法 本次实验共分为两大组,肾衰组和对照组。用分光光度计测量吸光度的方法算出血肌酐、尿肌酐和酚红排出量,然后再通过计算公式计算出肌酐清除率和酚红排泄率。结果 肾衰模型组家兔肾脏体积变大,颜色较浅,表面出现颗粒,体重比正常组重得多,%,%;%,%,酚红排泄率50%。结论 急性肾功能不全会引肾小管上皮细胞受损,从而导致起肾小管的重吸收功能障碍和分泌功能障碍。
【实验原理】
肾脏是一个多功能的器官,具有排泄、调节、内分泌等功能。引起急性肾功能不全主要原因有肾前性、肾性、肾后性三种。***化***是重金属盐,家兔皮下或肌肉注射10g/L***化***,可引起以肾小管坏死为主的急性肾功能不全。急性肾功能不全临床分为少尿型和非少尿型两种 ,前者多见。少尿型一般出现少尿甚至无尿,等渗尿,尿钠浓度高,尿常规可发现血尿,镜检有多种细胞并有管型(颗粒管型和细胞管型等)。血液尿素氮(BUN)和血浆肌酐进行性升高,肌酐从尿中排出障碍,尿肌酐/血肌酐<20,与功能性肾衰时>40有明显的区别。
急性肾功能不全评价的病理生理学指标有内生肌酐清除率、尿肌酐/血肌酐比值、肾脏酚红排泄率、钠排泄分数等,本实验主要测定酚红排泄率、内生肌酐清除率、尿肌酐/血肌酐比值及肾形态学的改变。
【关键词】 急性肾功能不全 酚红排泄率 血清肌酐 尿肌酐
【材料和方法】
1、材料:家兔;分光光度计,离心机,恒温水浴箱;***化***,氨基甲酸乙酯,酚红,NaOH,醋酸,碱性苦味酸,肌酐标准应用液,生理盐水,葡萄糖。
2、方法
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麻醉固定 将氨基甲酸乙酯以5ml/kg 的体重剂量由兔耳缘静脉内缓慢注入。待麻醉后,将家兔仰卧固定于兔手术台上,先后固定四肢及兔头。
膀胱插管 用止血钳提起膀胱至腹外,用两把止血钳相距对称地夹住膀胱顶,用手术在膀胱顶剪一个纵行小口,将膀胱插管插入,用一棉线将膀胱壁道。完成上述操作后,将膀胱插管平放在耻骨处,引流管自然垂下,管口低于膀胱水平。
采血 用干净且干燥的小注射器在家兔心尖部位刺入抽血,大约抽取3ml血液。将抽取的血液置于干净且干燥的小试管中备用。
采集尿液
酚红排泄率的测定
(1)从耳缘静脉快速注入6g/;从耳缘静脉缓慢注入30mL葡萄糖溶液。
(2)采集15min后的尿液,尿液移入250ml的量筒内,加入100/L NaOH5ml,使之显色。加蒸馏水至250ml,搅拌均匀。
(3)用比色法定性测定酚红排泄率。
肌酐测定
血清肌酐测定 将采集到的血液静置10min后,3000r/min离心15min,小心吸取血清置于另一干净试管中,侧血肌酐用。取硬质试管3支编号,分别为空白管、标准管及测定管。加样,混匀,37℃水浴30mn,用于分光光度计以波长510nm,空白管调零,读OD值。然后,各管加50%乙酸溶液两滴,放置6min