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三、核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法
50×TAE Buffer ()
组份浓度 2 M Tris-醋酸，100 mM EDTA
配制量 1 L
配制方法 ，置于1 L烧杯中。
Tris
242 g
Na2EDTA·2H2O
g
ml的去离子水，充分搅拌溶解。
ml的乙酸，充分搅拌。
L后，室温保存。
10×TBE Buffer ()
组份浓度 890 mM Tris-硼酸，20 mM EDTA
配制量 1 L
配制方法 ，置于l L烧杯中。
Tris
108 g
Na2EDTA·2H2O
g
硼酸
55 g
ml的去离子水，充分搅拌溶解。
L后，室温保存。
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10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer
组份浓度 200 rnM MOPS，20 mM NaOAc，10 mM EDTA
配制量 1 L
配制方法 g MOPS，置于1 L烧杯中。
ml DEPC处理水，搅拌溶解。
N 。
。
1 M NaOAc(DEPC处理)
20 ml
M EDTA()(DEPC处理)
20 ml
L。
m滤膜过滤除去杂质。
。
注：溶液见光或高温灭菌后会变黄。变黄时也可使用，但变黑时不要使用。
溴乙锭 (10 mg/ml)
组份浓度 10 mg/ml溴乙锭
配制量 100 ml
配制方法 g溴乙锭，加入到100 ml容器中。
ml，充分搅拌数h完全溶解溴乙锭。
，室温避光保存。
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g/ml。
注意：溴乙锭是一种致癌物质，必须小心操作。
Agarose凝胶
配制方法 (×TBE或1×TAE)。
，准确称量琼脂糖粉，加入适当的锥形瓶中。
(总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量)。
注：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一。
，并在膜上扎些小孔，然后在微波炉中加热熔化琼脂糖。加热过程中，当溶液沸腾后，请戴上防热手套。小心摇动锥形瓶。使琼脂糖充分均匀熔化。此操作重复数次，直至琼脂糖完全熔化。必须注意，在微波炉中加热时间不宜过长，每次当溶液起泡沸腾时停止加热，否则会引起溶液过热暴沸，造成琼脂糖凝胶浓度不准，也会损坏微波炉。熔化琼脂糖时，必须保证琼脂糖充分完全熔化，否则，会造成电泳图像模糊不清。
℃左右，如需要可在此时加入溴乙锭溶液( µg/ml)。并充分混匀。
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注：溴乙锭是一种致癌物质。使用含有溴乙锭的溶液时，请戴好手套。
，然后在适当位置处插上梳子。凝胶厚度 一般在3~5 min之间。
(大约30 min~1 h)，然后放置于电泳槽中进行电泳。
注：凝胶不立即使用时，请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保存，一 般可保存2~5天。
琼脂糖凝胶浓度与线形DNA的最佳分辨范围
琼脂糖浓度
最佳线形DNA分辨范围(bp)
%
0.