文档介绍：StreptavidinHRP 工作液：
StreptavidinHRP 工作液：
TUNE检测方法
DeadEndColorimetricTUNEL System 试剂盒法 检测原理：
细胞凋亡时，其DNL产生3' -OH末端，而正常细胞则几乎没有。使用末端
脱氧核昔转移酶(TdT酶)将生物素标记的核音酸连接到 DNA勺3' -OH末端。再将
辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(StreptavidinHRP) 结合 在此核昔酸上。 StreptavidinHRP 可与过氧化物酶的底物一一过氧化氢和稳定的显色剂氨基联苯
***(DAB)产生深棕色反应。即可通过光学显微镜观察到凋亡细胞。
材料
试剂盒(G7130)内容：
名称
小
说明
平衡缓冲液
生物素标记的核甘酸混合
物
40心l
2 x 20 心 l
TdT酶
40心l
2 x 20 心 l
StreptavidinHRP
40心l
ml
DAB 20X Chromogen
200 医 l
DAB Substrate 20X Buffer
200 医 l
Hydrogen Peroxide 20X
200 医 l
SSC, 20X
70ml
Proteinase K
10mg
Plastic Coverslips
40
(2 X 20)
StreptavidinHRP 工作液：
StreptavidinHRP 工作液：
储存条件：
平衡缓冲液，TdT酶，生物素标记的核昔酸混合物，蛋白酶 K - 20° C
StreptavidinHRP,DAB20XChromogen,20XDAB 底物缓冲液，20X过氧化氢：4° C
20XSSC塑料盖玻片：室温保存
需自备：
PBS缓冲液
%过氧化氢溶液（用以抑制内源性过氧化氢酶）
固定液（例如：10瘠冲的福尔马林，4戚聚甲醛，4陆甲醇甲醛）
封固剂
用于组织的检测方法
由试剂盒内容制备：
20 g/ml蛋白酶K工作液：
10mg蛋白酶K+ 1ml蛋白酶K缓冲液r - 10mg/ml蛋白酶K储备液一 20科g/ml蛋白酶 K工作液
TdT酶反应液（使用时制备）：
缓冲液成分
每标准
100ul反应
的成分体积
反应次数（实验
反应+选择性阳
性对照）
成分的体
积
平衡缓冲液
98ul
X
=
生物素化的核甘混
合物
1ul
X
=
rTdT 酶
1ul
X
=
2X SSC：
用去离子水1： 10稀释20XSSC
14. PBS5洗三次，每次 5min。（室温）
以 PBS500 1 稀释 StreptavidinHRP.
以 PBS500 1 稀释 StreptavidinHRP.
14. PBS5洗三次，每次 5min。（室温）
以 PBS500 1 稀释 StreptavidinHRP.
DAB混合液（使用时制备，避光， <30mins ）:
950ul去离子水+ 50U120XDAB底物缓冲液+ 50U1DAB20X色原体+50U120X过氧化
氢
步骤：
%***化钠溶液浸洗5mins （室温）
P