文档介绍：液相色谱实用技术液相色谱实用技术色谱柱的使用和保养色谱柱的使用和保养 Ci Ci =Ai =Ai × ×C C 标标/ /A A 标标含量%= 含量%= Ci Ci /M /M× × 100 100 % % 标示量= 标示量= Ci Ci /M /M× ×片重片重× ×系数系数 -50 0 50 100 150 200 ACCQ-TAG-2003-10-22 #7 AA-STD-2 UV_VIS_1 mAU min 4 - AMQ - 5 - 门东氨酸 - 6 - 丝氨酸 - 7 - 谷氨酸 - 8 - 杂质 - 9 - 甘氨酸 - 10 - 组氨酸 - 11 - 杂质 - 12 - 氨 - 13 - 精氨酸 - 14 - 苏氨酸 - 15 - 丙氨酸 - 16 - 脯氨酸 - 17 - 光氨酸 - 18 - 酷氨酸 - 19 - 缬氨酸 - 20 - 蛋氨酸 - 21 - 赖氨酸 - 22 - 异亮氨酸 - 23 - 亮氨酸 - 24 - 苯丙氨酸 - WVL:248 nm 样品: ( Asp) 2. 丝氨酸( Ser) 3. 谷氨酸 ( Glu ) 4. 甘氨酸 ( Gly ) 5. 组氨酸 ( His) 6. 氨( NH3) 7. 精氨酸 ( Arg ) 8. 苏氨酸 ( Thr ) 9. 丙氨酸 ( Ala) 10. 脯氨酸 ( Pro) 11. 光氨酸 ( Cys ) 12. 酪氨酸 ( Tyr ) 13. 缬氨酸( Val) 14. 蛋氨酸( Met) 15. 赖氨酸( Lys ) 16. 异亮氨酸( ILeu ) 17 亮氨酸( Leu ) 18 . 苯丙氨酸( Phe ) 分析条件: DIONEX-Summit HPLC 检测器: UV248nm 柱:氨基酸分析柱或 C18 柱流动相: A:乙酸纳缓冲液 B :60%乙晴水溶液 0 -67% B( 6-8 步梯度洗脱) 流速: ml/min 样品:10 ul17种氨基酸的 HPLC 分析(标准) 样品: ( Asp) 2. 丝氨酸( Ser) 3. 谷氨酸 ( Glu ) 4. 甘氨酸 ( Gly ) 5. 组氨酸 ( His) 6. 氨( NH3) 7. 精氨酸 ( Arg ) 8. 苏氨酸 ( Thr ) 9. 丙氨酸 ( Ala) 10. 脯氨酸 ( Pro) 11. 光氨酸 ( Cys ) 12. 酪氨酸 ( Tyr ) 13. 缬氨酸( Val) 14. 蛋氨酸( Met) 15. 赖氨酸( Lys ) 16. 异亮氨酸( ILeu ) 17 亮氨酸( Leu ) 18 . 苯丙氨酸( Phe )色谱柱的选择色谱柱的选择非非极性或极性较小的样品可用一般的极性或极性较小的样品可用一般的 C18 C18 柱柱酸碱性的化合物建议选用填料经封尾钝化过的酸碱性的化合物建议选用填料经封尾钝化过的 C18 C18 柱, 柱, PH PH范围范围 2-9 2-9 ( (12 12) ) 糖类,氨基酸,有机酸,多环芳烃, 糖类,氨基酸,有机酸,多环芳烃, GPC GPC 有专用柱有专用柱? ? 超快速柱子超快速柱子- -填料粒度填料粒度< <2 2μ μm m 键合相色谱柱键合相色谱柱以硅胶为基质,通过化学键合方式把碳十八、碳八、***以硅胶为基质,通过化学键合方式把碳十八、碳八、***基等基团联在基质上作为固定相。这种固定相要占所有基等基团联在基质上作为固定相。这种固定相要占所有柱填料的柱填料的 60-70% 60-70% 优点优点∶∶固定相稳定,不易流失固定相稳定,不易流失应用广泛,可使用多种溶剂应用广泛,可使用多种溶剂消除硅羟基的不良影响消除硅羟基的不良影响缺点缺点∶∶ pH pH值不