文档介绍:病毒感染的检查(jiǎnchá)方法
电镜技术
血清学试验
分子生物学技术
病毒的分离鉴定
标本采集与送检
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一、标本(biāoběn)采集与送检
原则: :发病(fā bìng)初期
:由感染部位采取
:装有冰块或干冰的容器内
(一)供分离病毒、检出核酸(hé suān)及抗原的标本
(二)检测特异性抗体 的标本
采集双份血清,4-20℃保存
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病毒材料采集与检验结果的关系
采取标本的时期
检查病毒及其成分
测定抗体
潜伏期及前驱期
刚发病或急性期
恢复期及康复期
较难查见
最多查见
很难查见
未增多
未增多或增多不明显
明显增多
(常超过4倍)
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病毒(bìngdú)分离是诊断病毒(bìngdú)感染的金标准,一旦阳性,即可确诊。
不适用于快速诊断,操作复杂,实验成本高,阳性检出率低等
有时不得不分离病毒(bìngdú),例如发现了一种新的病毒(bìngdú)病,必须分离病毒(bìngdú)进行研究,或者分离株的鉴定对流行病学有很大作用(如流感病毒(bìngdú)),或者需要培育疫苗,或者希望获得天然弱毒株等。
二、常规分离(fēnlí)与鉴定
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(一)病毒(bìngdú)分离
标本采集
杀灭杂菌
(青链霉素)
接种
鉴定病毒种型
易感动物
出现病状
鸡胚
病变或死亡
细胞培养
细胞病变
三大方法
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(二)病毒(bìngdú)鉴定
1. 形态学鉴定(jiàndìng)
观察(guānchá)CPE。常见的细胞形态学变化为细胞变圆、坏死、溶解、脱落或形成合胞体。有些病毒能形成包涵体。
正常细胞
病变细胞
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感染细胞具有吸附红细胞的能力
感染细胞的培养液中有许多游离病毒(bìngdú)存在,具有凝集红细胞的作用
2. 血吸附(xīfù)和血凝作用
多见于以出芽(chū yá)方式释放的病毒。
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红细胞吸附(xīfù)
正常(zhèngcháng)细胞
(1)血吸附(xīfù)作用
吸附试验可通过特异抗血清抑制来达到鉴定具有吸附特性的病毒
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(2)血凝作用(zuòyòng)
血凝试验(shìyàn)
血凝抑制(yìzhì)试验
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(3)病毒(bìngdú)成分的直接检测
用免疫学或分子生物学技术直接检查感染细胞(xìbāo)或其上清液中病毒抗原(或核酸)。
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