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血清胆碱酯酶测定标准操作规程.doc

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血清胆碱酯酶测定标准操作规程.doc

上传人:相惜 2021/10/21 文件大小:24 KB

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血清胆碱酯酶测定标准操作规程.doc

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血清胆碱酯酶测定标准操作规程
1 检验申请
单独检验项目申请:血清丁酰硫代胆碱法碱酯酶测定(缩写ChE),组合项目申请:血生化中肝功能测定。临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理
标本采集
常规静脉采血约2 ml,不抗凝,置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。
检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。
标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。
下列标本为不合格标本
标本量不足:,。
对反应吸光度有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。
无法确认标本与申请单对应关系的。
其他如标识涂改、标本试管破裂等。
标本保存
接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。
标本保存时间:室温(15~25℃)下可稳定24h,普通冰箱中(2~8℃)稳定7天。-20℃保存稳定6个月。为避免标本中水分挥发使血清浓缩,对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
已完成测试的标本保持完整的识别号,置4~8℃冰箱内保存7天。
标本采集的注意事项
采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动,和12h以上禁食空腹状态。
可以使用EDTA、枸橼酸盐、草酸盐抗凝的血液标本,但肝素抗凝剂可引起反应液混浊。
3 方法原理
Cholinsterase
Butyrylthiocholine iodide+H20…………thiocholine+butyrate,
Thiocholine+DTNB………2-nitro-5mercaptobenzoate,
通过测定有色产物480nm处吸光度的变化速率,求得血清中胆碱酯酶的活性。
4 试剂及其他用品
试剂盒名称:胆碱酯酶试剂盒,由北京利德曼生化技术有限公司出品。
试剂盒保存:未启封试剂盒在2~8℃保存,可储存至失效期。启封使用的试剂置仪器试剂仓冰箱内稳定14天。开盖后避免污染。
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试剂盒准备:液态双试剂型,即开即用,无特殊准备。
试剂盒主要成分:R1:磷酸盐缓冲液(pH ) mmol/L,5,5’-二硫双亚硝基苯甲酸 mol/L;R2:丁酰硫代胆碱 mmol/L。含有稳定剂与保护剂。
5 校准品与校准模式
校准品:不使用校准品,以2-硝基-5-巯基苯甲酸的双波长(480/660 nm)毫摩尔消光系数计算Che活性。
6 质控品与室内质控规则
质控品采用由Beckman-Coulter公司提供的两个不同水平未定值质控血清。
质控液重建方法:液态质控血清,即开即用,无需特殊准备。
质控品测定:在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。