文档介绍：沙门菌检验严纪文沙门菌概况?沙门菌是 1885 年由 Salmon 氏等在猪霍乱流行时,分离出的猪霍乱沙门菌,由于 Salmon 氏对本属细菌的发现贡献卓越,故定名为沙门菌属。?沙门菌属是肠杆菌科中最重要的病原菌。它是一群抗原结构、生化特性相似的革兰氏阴性杆菌。血清型繁多,目前已发现的沙氏菌有2500 多个血清型和变种。我国自 1911 年至 90年代初已有 255 个血清型。?虽然沙门菌的血清型很多,但多数国家从人体、动物和食品中分离出沙门菌仅约 40~50 个血清型。而在一个国家中的一定时期只约有10个血清型是比较常见的。分类: ?伤寒沙门菌(伤寒、副伤寒)-传染病防治法中规定报告的乙类传染病。?非伤寒沙门菌-食品卫生标准的检测的主要对象。沙门菌的生物学特性形态与染***: ?革兰氏阴性杆菌,无芽胞,一般无荚膜。?除鸡瘟沙门菌( )和鸡沙门菌( )外均有动力。为周身鞭毛,并多数有菌毛。?大小: 1~3um × ~1um 。?营养需求不高,需氧或兼性厌氧。普通营养培养基上均能生长,能够利用柠檬酸盐作为碳源。?在普通肠道选择性平板上基本上形成无色菌落。菌落中等大小,半透明,表面光滑,边缘整齐或呈锯齿状。?不分解乳糖,大部分菌株产 H 2S,发酵葡萄糖产酸不产气。培养与生化特性?最适培养温度为 37℃,最适 pH ~ 。?耐受胆盐,在粪便、土壤、食品、水中可生存 5个月至二年之久。沙门菌的分布?沙门菌广泛存在于自然环境中。?通过沙门菌病患者或健康带菌的人和动物的排泄物污染环境和食品。?易于污染的高危食物:畜禽肉类、蛋、奶及其制品。?沙门菌在肉类中不分解蛋白质,不产生靛基质,所以当食品污染了沙门菌后,通常没有感官性状的改变。修订内容?前增菌:取消样品分类,前增菌液统一为“缓冲蛋白胨水”。?对所有样品均进行 8~18 h前增菌。原标准只对冻肉、蛋品、乳品等加工食品进行前增菌。?修改了样品的处理方式: 增加拍击式均质器, 均质袋可直接培养。?样品液增加调整 pH值。?选择性增菌:使用“ TTB 、 SC ”,取消“ MM ”。?分离培养基:使用 BS 、 XLD 、 HE 、科玛嘉显色培养基。取消 DHL 、 SS 。?生化鉴定: 1. 采纳 API 20E 或 Vitek GNI 为传统生化鉴定方法的选择性替代方法。 2. 生化鉴定项目进行调整: ?原国标中生化鉴定是将可疑菌落同时接种于三糖铁( TSI )琼脂、蛋白胨水 (供做靛基质试验)、尿素琼脂 () 、***化钾 (KCN) 培养基和赖氨酸脱羧酶试验培养基; ?现修改为:在接种 TSI 琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的同时增加一项营养琼脂( NA ),经 TSI 琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的选择后,可筛掉大部分非沙门氏菌株,大大减少了工作量,同时也满足了 API 20E 或 Vitek GNI 鉴定的需要。?为保持与原标准的一致性,新标准也保留了可以同时直接接种蛋白胨水 (供做靛基质试验)、尿素琼脂 () 、 KCN 培养基的内容。本部分还增加了对疑似菌落进行留样确认的部分,以备必要时复查,这对生化鉴定不确定的菌落进行进一步验证是非常必要的。。??血清学鉴定中的菌体分群改为选择性试验血清学鉴定中的菌体分群改为选择性试验项目。项目。??报告:综合以上生化试验和血清学鉴定的报告:综合以上生化试验和血清学鉴定的结果结果, ,报告报告 25g 25g 样品中检出或未检出沙门菌。样品中检出或未检出沙门菌。