文档介绍:酶联免疫吸附实验
掌握酶联免疫吸附实验(ELISA)的原理
熟悉酶联免疫吸附实验的操作方法
了解其他免疫标记技术
一、实验目的
精品资料
你怎么称呼老师?
如果老师最后没有总结一节课的重点的难点,你是否会认为老师的教学方法需要改进?
你所经历的课堂,是讲座式还是讨论式?
教师的教鞭
“不怕太阳晒,也不怕那风雨狂,只怕先生骂我笨,没有学问无颜见爹娘 ……”
“太阳当空照,花儿对我笑,小鸟说早早早……”
二、实验原理
免疫学分析方法发展很快,特别是在使用标记了的抗原和抗体的分析技术以后,使原来许多经典的分析方法在敏感性和特异性方面都不能相比。继50年代的免疫荧光(IF)和60年代的放射免疫(RIA)分析技术之后,在70年代初期又建立了用酶来标记抗原或抗体的分析技术(酶免疫技术)。
是指用荧光素、放射性同位素、酶、发光剂或电子致密物质等作为示踪剂,标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应。
特点:高度灵敏、特异、快速,定性、定量、定位
分类:免疫酶技术、免疫荧光技术、放射免疫技术、免疫电镜技术、免疫胶体金技术和发光免疫测定。
免疫标记技术(immunolabelling technique)
免疫标记技术 =
抗原抗体反应
示踪物标记
灵敏性
特异性
免疫标记技术的主要特点:
高度特异性、高度灵敏性
免疫技术 + 标记技术
酶
荧光素
同位素
免疫标记技术
放射物标记技术
酶标记技术
免疫荧光技术
其他标记技术
酶联免疫吸附技术
酶免疫组化技术
是将抗原和抗体的特异性免疫反应与酶的催化反应相结合而建立的一种免疫检测技术。
就是利用酶标记抗体或抗原,以检测相应抗原或抗体的一种免疫学标记技术。
Ag + AbE AgAbE
+ 底物
呈色反应
酶免疫技术(enzyme immunoassay)
是一类常用的酶免疫技术。是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使抗原抗体反应在固相表面进行。
ELISA法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定。
ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血清流行病学调查。
本法不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。
酶联免疫吸附试验ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)